公开(公告)号
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CN1328380C
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公开(公告)日
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2007.07.25
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申请(专利)号
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CN01141415.4
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申请日期
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2001.09.24
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专利名称
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高效表达水蛭素及其生产方法
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主分类号
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C12N15/15(2006.01)I
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分类号
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C12N15/15(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C07K14/815(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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天津天士力制药股份有限公司
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发明(设计)人
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赵 凯;吴祖泽;苑 宾;张津辉;李满文;熊志红;蒋中华;董春娜;曹菊荣;于爱平
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地址
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300402天津市北辰科技园辽河东路1号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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天津;12
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主权项
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一种新型编码水蛭素的DNA分子,其特征在于该DNA分子与来源于水蛭的天然的水蛭素2型DNA分子相比,该DNA分子的第121位核苷酸由胞苷酸变异为鸟苷酸、第156位核苷酸由胸苷酸变异为胞苷酸,第157位核苷酸由腺苷酸变异为鸟苷酸;其前导序列为CTCGAGAAAAGA。
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摘要
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本发明涉及一种生物工程的抗栓药物及其生产方法,具体而言是涉及一种新型水蛭素及其生产方法。采用全人工合成的方法获得变异的HV2全基因,在其5’端上游加入一段合适前导序列。构建毕赤酵母分泌型表达载体pHV2,载体转化宿主细胞GS115,并整合入宿主细胞的染色体中。筛选高效表达菌株,经优化发酵诱导、分离纯化步骤,提高了重组基因产物的生产效率,产物表达水平和生物学活性,以及对抗凝、抗栓的药效学研究表明,高于文献报道,这为水蛭素II型的大规模生产和临床应用的深入研究提供了物质来源。
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国际公布
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