公开(公告)号
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CN101062413A
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公开(公告)日
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2007.10.31
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申请(专利)号
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CN200710040471.5
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申请日期
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2007.05.10
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专利名称
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抗犬细小病毒卵黄抗体生物制剂的制备方法
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主分类号
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A61K39/395(2006.01)I
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分类号
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A61K39/395(2006.01)I;C07K16/08(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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上海交通大学
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发明(设计)人
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刘永德;唐 峰;叶陈梁;汪 毅
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地址
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200240上海市闵行区东川路800号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海交达专利事务所
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代理人
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王锡麟;张宗明
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种抗犬细小病毒卵黄抗体生物制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 步骤一,采集诊断为细小病毒感染的病死犬的肠道及内容物按重量比1∶1加生理盐水研磨,离心去除沉渣,上清液离心去除微小颗粒; 步骤二,在去除微小颗粒后的上清液中加入氯仿,剧烈振荡,离心去除脂溶性物质; 步骤三,取去除脂溶性物质后的上清液,加入醛化、洗涤后的猪红细胞,摇匀放置进行病毒吸附,离心沉淀猪红细胞,加入高渗盐水后放置进行病毒释放,离心去除猪红细胞,取病毒释放液,测HA效价,达1∶4096有效; 步骤四,取上述病毒释放液经甲醛灭活后加入褐藻多糖,制备成油乳剂犬细小病毒疫苗,将制备的犬细小病毒疫苗免疫20周龄以上经产母鸡,用血凝抑制试验进行效价测定,当卵黄中HI效价达1∶256以上时收集免疫卵,效价低于1∶128时进行第三次免疫; 步骤五,收获卵黄用无菌蒸馏水对倍稀释,用乳酸液进行酸处理去除杂蛋白、冻融去脂,抽滤液经硫酸铵盐析提取IgY,除盐后稀释封装安培瓶中,放水浴箱处理,经口服安全性检验及微生物检验合格后即成口服生物制剂。
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摘要
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一种抗犬细小病毒卵黄抗体生物制剂的制备方法,采集诊断为细小病毒感染的病死犬病料,离心去除沉渣,上清液离心,取上清液加入氯仿,剧烈振荡,离心取上清液加入醛化洗涤后的猪红细胞,摇匀放置,离心取沉淀,加入盐水后放置,离心取病毒释放液测HA效价,达1:4096有效;取上述病毒释放液经甲醛灭活后加入褐藻多糖制备成油乳剂犬细小病毒疫苗,将该疫苗免疫经产母鸡后用血凝抑制试验测定免疫卵HI效价,达标后收获卵黄用无菌蒸馏水对倍稀释,用乳酸液进行酸处理去除杂蛋白、冻融去脂,抽滤液进行盐析,除盐后调整IgY的浓度分装,放水浴箱处理,即成口服生物制剂,其IgY的得率达95%以上,活性不受任何影响,一个免疫卵一般可得IgY 70-100mg。
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国际公布
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