| 公开(公告)号 | CN101092618A |
| 公开(公告)日 | 2007.12.26 |
| 申请(专利)号 | CN200710068724.X |
| 申请日期 | 2007.05.22 |
| 专利名称 | 溶葡萄球菌酶的制备方法和其衍生物及衍生物的制备方法 |
| 主分类号 | C12N15/09(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/09(2006.01)I;C12N9/36(2006.01)I;C12N15/56(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 杭州北斗生物技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 刘国安;刘沐荣;康经武 |
| 地址 | 310011浙江省杭州市祥园路39号5号楼5楼 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 杭州丰禾专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 王鹏举 |
| 国省代码 | 浙江;33 |
| 主权项 | 溶葡萄球菌酶的制备方法，其特征在于包括以下的步骤： (1)、溶葡萄球菌酶基因的设计与合成； (2)、表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌：将溶葡萄球菌酶基因片段插入到表达载体质粒的酶切位点，然后直接转化大肠杆菌宿主菌，其中所述的表达载体质粒是pET系列载体质粒； (3)、阳性克隆的筛选、培养、诱导表达：筛选出阳性克隆在培养基上进行培养，经诱导使目标蛋白表达； (4)、表达产物的分离、纯化：将大肠杆菌工程菌菌体收集、破菌，经离心得到破菌液上清，然后对破菌液上清用层析技术纯化。 |
| 摘要 | 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及溶葡萄球菌酶的制备方法和其衍生物及衍生物的制备方法。溶葡萄球菌酶的制备方法主要包括：设计并合成优化的溶葡萄球菌酶基因，构建表达载体后转化大肠杆菌工程菌，筛选高表达菌株，发酵培养工程菌，表达产物分离纯化。其中所述的表达载体质粒是pET系列载体质粒。本发明的方法，表达方案简单，表达量高，纯化工艺简单，收率高，表达产物可溶，不需要复性，直接用层析方法进行纯化，纯化收率大大提高，适合大规模制备。本发明公开的溶葡萄球菌酶衍生物由PEG修饰后免疫原性降低，半衰期延长，适合临床应用于葡萄球菌感染的治疗。 |
| 国际公布 |
