以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法
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公开(公告)号
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CN101096654A
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公开(公告)日
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2008.01.02
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申请(专利)号
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CN200710041123.X
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申请日期
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2007.05.24
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专利名称
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以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法
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主分类号
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C12N5/08(2006.01)I
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分类号
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C12N5/08(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)N
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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上海交通大学
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发明(设计)人
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韩 伟;吴明媛;林小娟;姜俊芬
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地址
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200240上海市闵行区东川路800号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海交达专利事务所
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代理人
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王锡麟;王桂忠
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征在于，具体步骤包括： (1)从髓、外周血或脐带血中取样，用密度梯度离心分离出单核细胞，然后用CD34分离试剂盒对CD34细胞进行标记，采用免疫磁珠技术对CD34细胞进行纯化，得到CD34+细胞； (2)采用含10％-20％胎牛或人血清的细胞培养基对上述CD34+细胞进行培养，加入细胞因子，加入蛋白，培养1周，换入细胞培养基，并重新加入蛋白再继续培养扩增1周，得到增殖了的造血干细胞、祖细胞。
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摘要
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本发明是一种生物工程技术领域的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法。步骤包括：(1)从骨髓、外周血或脐带血中，用密度梯度离心法分离制备单个核细胞，然后对CD34细胞进行标记，而后对其进行纯化，得到CD34+细胞；(2)将CD34+细胞加入细胞培养基中进行培养，同时加入细胞因子和GST-hDSL重组蛋白，培养后，换入新鲜的细胞培养基并重新加入细胞因子和GST-hDSL重组蛋白再继续培养，得到增殖了的造血干、祖细胞。从CD34+细胞和从总集落数及高增殖潜能集落数来检测，本发明可有效促进人造血干、祖细胞的增殖，并将在生物医药领域得到广泛的应用。
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国际公布
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