公开(公告)号
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CN101100655A
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公开(公告)日
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2008.01.09
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申请(专利)号
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CN200710042044.0
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申请日期
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2007.06.15
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专利名称
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胚胎源性多能干细胞向心脏起搏细胞定向诱导分化的方法
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主分类号
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C12N5/06(2006.01)I
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分类号
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C12N5/06(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)N
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军第二军医大学
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发明(设计)人
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张 喜;张传森
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地址
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200433上海市翔殷路800号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海德昭知识产权代理有限公司
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代理人
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丁振英
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种胚胎源性多能干细胞向心脏起搏细胞定向诱导分化的方法,其特征在于该方法包括: I.胚胎源性多能干细胞的分离、培养、鉴定 采用全骨髓直接贴壁法获得原代培养的细胞,然后按有限稀释法进行克隆培养获得该细胞的纯化系,通过对CD133、SSEA-1、CD45、Oct-4和Nanog标记物的检测进行鉴定; II.胚胎源性多能干细胞向心脏起博细胞的诱导分化 向胚胎源性多能干细胞施加旁分泌因子、胞外基质组分层粘连蛋白、纤维连接蛋白,诱导胚胎源性多能干细胞分化为心脏起搏细胞。
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摘要
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本发明涉及干细胞诱导分化技术领域。目前构建生物心脏起搏器的细胞移植方法主要是以胚胎源性干/祖细胞和成体间充质干细胞作为细胞来源。本发明利用胚胎源性多能干细胞定向诱导分化心脏起搏细胞,采用全骨髓直接贴壁法获得原代培养的细胞,按有限稀释法进行克隆培养获得该细胞的纯化系,通过施加旁分泌因子内皮素-1或神经调节蛋白-1,胞外基质组分层粘连蛋白、纤维连接蛋白等基质胶;同时转染转起搏基因HCN4的方法体外诱导胚胎源性多能干细胞向起搏细胞方向分化。本发明提供一种供给广泛、无免疫原性、不涉及伦理学问题的起搏细胞来源,为临床治疗病态窦房结综合症等缓慢性心率失常带来希望。
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国际公布
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