公开(公告)号
|
CN101100664A
|
公开(公告)日
|
2008.01.09
|
申请(专利)号
|
CN200610041237.X
|
申请日期
|
2006.07.28
|
专利名称
|
重组犬α型干扰素的制备方法
|
主分类号
|
C12N15/09(2006.01)I
|
分类号
|
C12N15/09(2006.01)I;C12N15/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K14/56(2006.01)I;A61K38/21(2006.01)N;A61K9/19(2006.01)N;A61P31/12(2006.01)N
|
分案原申请号
|
|
优先权
|
|
申请(专利权)人
|
王明丽
|
发明(设计)人
|
王明丽
|
地址
|
230000安徽省合肥市梅山路安医大微生物教研室
|
颁证日
|
|
国际申请
|
|
进入国家日期
|
|
专利代理机构
|
安徽合肥华信知识产权代理有限公司
|
代理人
|
余成俊
|
国省代码
|
安徽;34
|
主权项
|
重组犬α型干扰素的制备方法,是依次进行以下步骤: (1)、构建克隆载体: 目的基因为:atggccctgc cctgctcctt ctcggtggcc ctggtgctgc tcagctgcca ctccctgtgctgtctggctt gcgacctgcc cgacacccac agcctgcgca actggagggt cctgacgctc ctgggacagatgaggagact ctccgccagc tcttgtgacc actacaccac tgactttgcc ttccccaagg aactgtttgatggccagcgg ctccaggagg cgcaagccct ctctgtggtc cacgtgatga cccagaaggt cttccacctcttctgcacga acatgtcctc tgctccttgg aacatgaccc tcctggggga attgtgctcg gggctctctgagcagctgga tgacctggat gcctgtcccc tgcaggaggc agggctggcc gagacccccc tcatgcatgaagactccacc ctgaggacct acttccaaag gatctccctc tacctgcaag acaggaacca cagcccgtgtgcctgggaga tggtccgagc agaaatcggg agatccttct tctccttgac catcttgcaa gaaagagtaaggaggaggaa atga 特异性引物:上游:AAT TTG CCA CCT GCC CGA CA 下游:GAT CTT TCC TCC TCC TGA TTC TTT C 克隆载体:pMD18-T simple vector (2)、构建表达载体: 表达载体:PET-28a (3)、重组蛋白的表达: 挑取载体构建成功的重组表达菌进行扩增、放大培养,并加入诱导剂诱导表达; (4)、鉴定重组蛋白; (5)、纯化重组蛋白,得到粗制品干扰素。
|
摘要
|
本发明公开了一种重组犬α型干扰素的制备方法,系将特异性引物PCR扩增犬α型干扰素的目的基因,与表达载体PET-28a进行连接,转化大肠杆菌,使其高效表达犬α型干扰素,经高度纯化后除菌、分装和冻干等工艺制成重组犬α型干扰素冻干粉针剂。本发明制备工艺简单,易于工业化生产,经冻干后易运送和保藏。产品质量可靠。重组犬α型注射犬机体后,具有疗效好、安全可靠和无毒副作用等特点。可用于治疗犬细小病毒病、病毒性腹泻等疾病,是一种广谱抗病毒制剂。
|
国际公布
|
|