公开(公告)号
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CN100363497C
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公开(公告)日
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2008.01.23
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申请(专利)号
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CN200510065889.2
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申请日期
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2005.04.21
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专利名称
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基因重组技术制备PGRP31-98片段的方法
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主分类号
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C12N15/63(2006.01)I
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分类号
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C12N15/63(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;C07K16/30(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国辐射防护研究院
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发明(设计)人
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周小林
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地址
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030006山西省太原市学府街270号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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核工业专利中心
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代理人
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任晓航
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国省代码
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山西;14
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主权项
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一种基因重组技术制备PGRP(31-98)片段的方法,其特征在于:该方法用pRSETc载体与PGRP(31-98)基因片段进行连接,采用NheI和HindIII双酶切位点定向克隆,以保证正确的插入连接方向;将连接有目的基因的pRSETc载体转化到广泛用于靶基因表达的大肠杆菌BL21DE3进行重组表达;将表达的PGRP(31-98)产物进行分离、纯化。
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摘要
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本发明涉及一种肺癌抗原的人工制备技术,具体为基因重组技术制备PGRP(31-98)片段的方法。该方法用pRSETc载体与PGRP(31-98)基因片段进行连接,采用NheI和HindIII双酶切位点定向克隆,以保证正确的插入连接方向;将连接有目的基因的pRSETc载体转化到广泛用于靶基因表达的大肠杆菌BL21DE3进行重组表达;将表达的PGRP(31-98)产物进行分离、纯化。保证了PGRP(31-98)表达产物的正确、特异、稳定和高效,相对现有技术大大缩短了制备的时间;克服了现有技术中用溴化氰切除表达产物上的TrpE蛋白带来的缺点,有利于大量人工制备工艺的建立和产品的稳定。
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国际公布
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