公开(公告)号
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CN101113448A
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公开(公告)日
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2008.01.30
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申请(专利)号
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CN200710011961.2
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申请日期
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2007.07.03
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专利名称
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白眉蝮蛇去整合素定点突变体cDNA的克隆、表达及其蛋白质制法与应用
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主分类号
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C12N15/12(2006.01)I
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分类号
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C12N15/12(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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赵宝昌
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发明(设计)人
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赵宝昌
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地址
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116023辽宁省大连市沙河口区扬州街69-203
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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大连科技专利代理有限责任公司
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代理人
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于忠晶
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国省代码
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辽宁;21
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主权项
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白眉蝮蛇去整合素的定点突变体cDNA序列,其特征是:将白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突变成C145、C146和A148,得cDNA含219个碱基对,核苷酸序列为: GAGGCCGGAG AAGAATGTGA CTGTGGCTCT CCTGGAAATC CGTGCTGTGA 50 TGCTGCAACC TGTAAACTGA GACAAGGAGC ACAGTGTGCA GAAGGACTGT 100 GTTGTGACCA GTGCAGATTT ATGAAAAAAG GAACAGTATG CCGGCCAACA 150 AGGGGTGATG ACATGGATGA TTACTGCAAT GGCATATCTG CTGGCTGTCC 200 CAGAAATCCC TTCCATGCC 219。
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摘要
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本发明涉及生物领域。白眉蝮蛇去整合素定点突变体cDNA的克隆、表达及其蛋白质制法与应用,白眉蝮蛇蛇毒突变体蛋白质的cDNA序列将白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突变成C145、C146和A148,得cDNA含219个碱基对,与相应的蛋白质序列及在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达,制备方法简单易操作,从白眉蝮蛇毒腺中分离提取出总RNA,利用RT-PCR的方法反转录出总cDNA,对其进行定点突变得到一条长度为219bp的多核苷酸序列。还提供一个大肠杆菌BL21和毕赤酵母菌中成功表达的分子量约为8000的小分子量蛋白质。此蛋白质具有显著的抗血管生成作用,而无抑制血小板聚集作用。其在抗肿瘤的药物中的应用,具有较高的安全性及较低的副作用,具有更高的应用价值。
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国际公布
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