公开(公告)号
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CN101130779A
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公开(公告)日
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2008.02.27
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申请(专利)号
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CN200710070109.2
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申请日期
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2007.07.20
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专利名称
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一种双启动子调控腺病毒蛋白的方法及用途
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主分类号
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C12N15/66(2006.01)I
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分类号
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C12N15/66(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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浙江大学
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发明(设计)人
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滕理送;毛晨宇;王浩浩;华汉巨;曹 江
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地址
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310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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杭州求是专利事务所有限公司
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代理人
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张法高;赵杭丽
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国省代码
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浙江;33
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主权项
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一种用双启动子调控腺病毒蛋白的方法,其特征是:双启动子是人端粒酶催化亚单位启动子和环氧化酶2启动子,(1)是用Age I单酶切,利用连接反应把人端粒酶催化亚单位启动子插入到腺病毒载体pXC1的E1A前启动子区域,(2)用Eag I单酶切,利用连接反应把环氧化酶2启动子插入到腺病毒载体pXC1的E1B前启动子区域,(3)把人端粒酶催化亚单位启动子和环氧化酶2启动子同时插入到一个腺病毒pXC1载体上,分别调控腺病毒早期基因E1A和E1B,所述人端粒酶催化亚单位启动子具有SEQ ID NO.7的核苷酸序列,所述环氧化酶2启动子具有SEQ ID NO.8的核苷酸序列。
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摘要
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本发明提供一种用双启动子调控腺病毒蛋白的方法,是利用人端粒酶催化亚单位启动子和环氧化酶2启动子,用Age I单酶切和EagI单酶切,分别插入到腺病毒载体pXC1的E1A和E1B前启动子区域,然后再同时插入到一个腺病毒pXC1载体上,分别调控腺病毒早期基因E1A和E1B。本发明的方法可在制备调控腺病毒早期基因E1A和E1B的肿瘤基因药物中应用。本发明方法设计合理,实验证明,这种重组腺病毒能选择性地在表达端粒酶和环氧化酶2的肿瘤细胞内增殖并杀伤肿瘤细胞,而在正常细胞内不增殖。
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国际公布
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