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您现在的位置: 医学全在线 > 药学理论 > 中国药品专利文献 > 正文:一种重组可溶性人FGFR2胞外段及其生产方法与应用专利检索:专利号/专利人/发明人
    

一种重组可溶性人FGFR2胞外段及其生产方法与应用

公开(公告)号 CN101139387A  
公开(公告)日 2008.03.12  
申请(专利)号 CN200710029286.6  
申请日期 2007.07.20  
专利名称 一种重组可溶性人FGFR2胞外段及其生产方法与应用  
主分类号 C07K14/47(2006.01)I  
分类号 C07K14/47(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;A61K36/17(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 暨南大学  
发明(设计)人 洪 岸;汪 炬;张志成  
地址 510630广东省广州市天河区石牌  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 广州粤高专利代理有限公司  
代理人 陈 卫  
国省代码 广东;44  
主权项 一种重组可溶性人FGFR2胞外段的生产方法,其特征在于包括如下步骤: (1)目的基因截短型FGFR2的构建; 根据截短型FGFR2胞外段氨基酸序列,按照大肠杆菌密码子偏好性原则设计四对引物,四对引物序列分别如序列表NO:1~NO:4所示,由内而外分别进行四轮重叠延伸扩增,首先是F1、R1互为模版扩增,然后以第一轮产物作为模版,F1、R1作为引物进行下一轮的扩增,如此进行4轮扩增; (2)FGFR2双突变型的构建; 针对S252W和P253R双突变的引物称为M252+253_F和M252+253_R,序列如序列表NO:5所示; (3)双酶切FGFR2基因与载体,连接构建重组载体,转化宿主菌,构建FGFR2基因工程菌; (4)培养FGFR2基因工程菌,分离、清洗、溶解包涵体得到包涵体溶解液; (5)纯化包涵体; (6)复性; (7)超滤、冻干得到可溶性人FGFR2胞外段。  
摘要 本发明公开了一种重组可溶性人FGFR2胞外段及其生产方法与应用。本发明在通过大肠杆菌高效表达FGFR2的基础上,对影响其复性效率的各种因素进行了定性定量研究,确定了重组人可溶性人FGF受体胞外段体外变复性的较为合适的方法,使其复性效率达到10%~20%,且成本低、周期短、适合大规模生产。本发明利用游离的FGFRs的胞外段与血液及肿瘤组织中的FGFs结合,降低了游离FGFs的水平,从而竞争性抑制了FGFs的信号,有效抑制了肿瘤的增殖、转移以及血管形成,并以S252W+P253R双突变型FGFR2胞外段的效果最佳。  
国际公布  
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