公开(公告)号 | CN101144080A |
公开(公告)日 | 2008.03.19 |
申请(专利)号 | CN200710129894.4 |
申请日期 | 2007.08.01 |
专利名称 | 重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法 |
主分类号 | C12N15/09(2006.01)I |
分类号 | C12N15/09(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 北京化工大学 |
发明(设计)人 | 陈劲春;常 婧 |
地址 | 100029北京市朝阳区北三环东路15号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | |
代理人 | |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种重组人VIP-HN融合蛋白的制备方法,其特征在于,采用基因工程菌发酵法生产,而不是从天然存在的生物材料中制备。 |
摘要 | 发明专利名称:重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法 技术领域:本发明涉及生物工程、食品工程、保健品领域。本发明采用DNA重组技术,根据大肠杆菌偏爰密码,设计、合成了串联共表达人VIP-Humanin融合蛋白的编码基因并由BamHI和SaCI定向克隆进pET28a(+);筛出阳性克隆之后,挑取一个单菌落对其发酵条件和产物分离纯化工艺进行优化处理。发酵3h左右OD600达到0.6~0.7时,加入诱导剂至终浓度1mmol/mL,诱导表达4h目标蛋白合成达到高峰,粗蛋白采用Ni-螯合亲和层析进行初分,DEAE-sepherose离子交换柱纯化,经重组肠激酶酶切纯化后获得rhVIP-Humanin融合蛋白。采用Tricine-SDS-PAGE,RP-HPLC和MALDI-TOF-TOF-MS等表征确认所制备的蛋白是rhVIP-Humanin。它将用于防治老年痴呆症。 |
国际公布 |