公开(公告)号
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CN101148662A
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公开(公告)日
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2008.03.26
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申请(专利)号
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CN200710092672.X
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申请日期
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2007.09.06
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专利名称
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一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法
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主分类号
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C12N15/09(2006.01)I
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分类号
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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重庆大学
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发明(设计)人
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胡宗利;陈绪清;陈国平;潘 宇;杨妤欣;胡廷章
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地址
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400044重庆市沙坪坝区正街174号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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重庆志合专利事务所
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代理人
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胡荣珲
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国省代码
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重庆;85
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主权项
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一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法,其特征在于该方法包括以下步骤: (1)构建诱导型GST-CCR5融合蛋白表达载体; (2)将GST-CCR5融合蛋白表达载体转化粟酒酵母,筛选和鉴定粟酒酵母转化子; (3)GST-CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达; (4)确证CCR5基因在粟酒酵母中得到表达; (5)分离和纯化GST-CCR5融合蛋白; (6)检测分离纯化的GST-CCR5融合蛋白; (7)鉴定分离纯化的GST-CCR5融合蛋白; (8)人类CCR5蛋白从GST-CCR5融合蛋白中的分离和纯化。
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摘要
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本发明公开了一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法,该方法主要包括步骤:构建诱导型GST-CCR5融合蛋白表达载体并转化粟酒酵母;鉴定粟酒酵母转化子;GST-CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达;确认CCR5基因在粟酒酵母中得到表达;分离和纯化GST-CCR5融合蛋白;检测分离纯化的GST-CCR5融合蛋白;鉴定分离纯化的GST-CCR5融合蛋白;从GST-CCR5融合蛋白中的分离和纯化人类CCR5蛋白。本发明的方法可以应用于在粟酒酵母中表达高等动植物的膜蛋白,并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。表达的膜蛋白对于研究其晶体结构和高通量药物筛选有应用价值。
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国际公布
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