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四 浓缩、干燥及保存
(一)样品的浓缩
一般抽提液的体积都比较大，应先进行浓缩处理。常用的浓缩方法有下面几种。
1、沉淀法
在抽提液中加入适量的中性盐或有机溶剂，使有效成分变为沉淀。经离心或过滤收集的沉淀物，加少量缓冲液溶解后，再经离心除去不溶物，获得的上清液通过透析或凝胶过滤脱盐，即可供纯化使用。
2、吸附法
通过吸收剂直接吸收除去溶液分子使之浓缩。所用的吸收剂必须与溶液不起化学反应，对生物大分子不吸附，易与溶液分开。常用的吸收剂有聚乙二醇，聚乙烯吡咯酮、蔗糖和凝胶等。使用聚乙二醇吸收剂时，先将生物大分子溶液装入半透膜的袋里，外加聚乙二醇覆盖置于４℃下，袋内溶剂渗出即被聚乙二醇迅速吸去，聚乙二醇被水饱和后可更换新的，直至达到所需要的体积。
3、超过滤法
把抽提液装入超过滤装置，在空气或氮气压力下，使小分子物质（包括水分)通过半透膜（如硝酸纤维素膜)，大分子物质留在膜内。
4、透析浓缩法
把装抽提液的透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇（PEG)或甘油中，10ml抽提液可在１ｈ内浓缩到几乎无水的程度。这种方法的浓缩速度与透析袋的表面积以及PEG的数量有密切关系。
5、减压蒸馏浓缩法
将抽提液装入减压蒸馏器的圆底烧瓶中，在减压真空状态下进行蒸馏。当真空度较高时，溶液的沸点可控制在３０℃以下。这种方法一般适用于常温下稳定性好的物质。
6、冰冻干燥法
冰冻的抽提液在真空状态下，可以由固体直接变为气体。用此原理进行浓缩，有效成分几乎不会破坏。冻干机主要由低温干燥箱、真空泵和冷冻机构成。在冻干小体积样品时，可以将其置玻璃真空干燥器中进行。具体作法是，把分装至小瓶中的样品冰冻后放入装有五氧化二磷或硅胶吸水剂的真空干燥器中，连续抽真空使其达到浓缩、干燥状态。
（二)干燥
干燥是将潮湿的固体、半固体或浓缩液中的水分（或溶剂)蒸发除去的过程。生物大分子的制备得到所需的产品后，为了防止变质，易于保存和运输，常需要干燥处理，最常用的方法是冷冻干燥和真空干燥，某些无活性核酸、微生物酶制剂和酪蛋白等工业产品则较多地应用于喷雾干燥、气流干燥等直接干燥法。
1、真空干燥
在相同温度下，被干燥物质所含水分或溶剂由于周围空气压力的减少而蒸发速度增加。真空度愈高，溶液沸点愈低，蒸发愈快，其原理与真空浓缩（或称减压浓缩)相同。真空干燥适用于不耐高温、易氧化物质的干燥和保存，整个装置包括干燥器、冷凝器及真空泵三部分。干燥器顶部连接一带活塞的管道接通冷凝器，气化后的蒸气由此管道通过冷凝管凝聚，冷凝器另一端连接真空泵，干燥器内常放一些干燥剂如五氧化二磷、无水氯化钙等，以便样品的干燥保存。
2、冷冻真空干燥
冷冻真空干燥，除利用真空干燥原理外，同时增加了温度因素。在相同压力下，水蒸汽压随温度的下降而下降，故在低温低压下，冰很易升华为气体。操作时，一般先将待干燥液体冷冻到冰点以下使之变成固体，然后在低温低压下将溶剂变成气体而除去。此法干燥后的产品具有疏松、溶解度好、保持天然结构等优点，适用于各类生物大分子的干燥保存。
3、喷雾干燥
喷雾干燥是将液体通过喷洒装置喷成雾滴后，与干燥介质（一般为热空气)直接接触干燥的方法。由于液体分散为雾滴时，直径通常只有1～200微米大小，与热空气接触面大，水分蒸发很快。在100℃的热空气中，只需不到一秒的时间即可干燥。因干燥时间短和水分蒸发时吸收热量，使液滴及其附近的空气温度较低，故工业上常用于干燥微生物酶制剂和某些生化产品。
(三)保存
生物大分子的储藏保存可分为干固态储藏和液态储藏两种医学全在,线www.lindalemus.com。储藏避免长期暴露于空气中被微生物的污染。并应注意低温保存。
1、干态储藏
干燥的制品一般比较稳定，如制品含水量很低，在低温情况下，生物大分子活性可在数个月甚至数年内没有显著变化。储藏方法也很简单，只将干燥后的样品置于干燥器内（内装有干燥剂)密封，保存在0～４℃冰箱中即可。有时为了取样方便和避免取样时样品吸水和污染，可先将样品分装到许多小瓶中，每次用时，只取出一小瓶。
2、液态储藏
液态储藏的优点是减去干燥这一步骤，生物大分子的生理活性和结构破坏较少，缺点是需要较严格的防腐措施，储藏时间不能太长。如样品量大时封装运输不方便。液态储藏注意事项如下：
（１)样品不能太稀，必须浓缩至一定浓度后才能封装储藏，否则，容易引起生物大分子变性。
（２)一般需加入防腐剂和稳定剂，常用防腐剂有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等。蛋白质和酶常用的稳定剂有硫酸铵糊、蔗糖、甘油等，如酶也可加入底物和辅酶以提高其稳定性，此外钙、锌、硼酸等盐溶液对某些酶也具有一定保护作用。核酸大分子一般保存在氯化钠或柠檬酸与氯化钠的标准缓冲液中。
（3)贮藏温度要求较低，大多数在０℃左右冰箱保存即可，有的则要求更低。
