目的和要求
掌握尿液化学检验方法及尿沉渣的检验方法和操作,并能认识某些沉渣及管型。
内容和方法
一、尿液酸碱反应测定
用广泛pH试纸测定酸碱反应,方法是取试纸条浸于尿中,数秒钟后取出。与标准色板比色,与色板相同颜色所指示的数字,即为该尿液的pH。也可用酸度计测定。
草食动物的尿液为碱性,肉食动物尿液为酸性,杂食动物则近于中性。健康动物尿液pH:马7.2—7.8'牛8—8.5;猪6.5—7.8;犬6.0—7.0。
草食动物的尿液变为酸性,见于某些热性病,长期食欲不振,长期营养不良,某些原因引起的采食困难(如咽炎),某些营养代谢疾病(如奶牛酮病,各种家畜的骨软病)等。
肉食兽的尿液变为碱性,见于泌尿系统的炎性疾病(如膀胱炎)医学全在线搜集整,理www.lindalemus.com。杂食兽的尿液显著的偏酸或偏碱都是不正常的,其临床意义与草食兽或肉食兽的病理情况相同。
二、尿中蛋白质的检验
1.原理检查尿中蛋白质的方法甚多,其原理基于蛋白质遇酸类,重金属盐或中性盐作用发生凝固沉淀,或加热而使其凝固,或加酒精使其凝固。
2.方法
(1)硝酸试法。取一支中试管,先加35%硝酸1—2m1,随后沿试管壁缓隘滴加尿液,使两液重叠,静置5min,观察结果。两液叠面产生白色环者为阳性反应。白色环愈宽,表示蛋白质含量愈高。按含量的多少,常用1—4个“+”号表示。
(2)磺柳酸试法。置酸化尿液少许于载玻片上,滴加20%磺柳酸液1—2滴,如有蛋白质存在,即产生白色浑浊,此法观察极为方便,其灵敏度很高,约为0.0015%.
三、尿中潜血的检验
健康家畜的尿液不含有红细胞或血红蛋白。尿液中不能用肉眼直接观察出来的红细胞或血红蛋白叫做潜血(隐血,Occunblood),可用化学方法加以检查。
1.原理尿液中的血红蛋白或红细胞被酸破坏所产生的血红蛋白,有过氧化氢酶的作用(但并非为酶,因为被煮沸后仍有触媒作用),它可以分解过氧化氢而产生新生态的氧,使联苯胺氧化成呈蓝色的联苯胺蓝。其反应式如156页上。
2.试剂化学纯联苯胺,冰醋酸,过氧化氢溶液,过氧化钠,50%醋酸溶液等。
3.方法
联苯胺法。取联苯胺少许(约一刀尖),溶解在2ml冰醋酸中,加双氧水2—3ml,混合后,加入等量被检尿,如液体变绿色或蓝色,表示尿中有血红蛋白存在。
四、尿中葡萄糖的检验
健康家畜的尿中仅含微量的葡萄糖,用一般化学试剂无法检出,故认为正常尿中不含糖。用一般方法能检验出尿中含葡萄糖时,称为糖尿(Glycosuria)医.学,全 在线提供www.lindalemus.com,表示机体的碳水化合物代谢障碍或肾的滤过机能严重破坏。
1.原理葡萄糖含有自由醛基(一CHO),具有还原性质,在热碱性溶液中,能将硫酸铜还原成黄色的氧化铜或黄色的氧化亚铜,又因二价铜盐在水解时会生成不溶解的氢氧化铜沉淀,故在试剂中加入柠檬酸钠,使与铜离子结合,以保持稳定状态。
2.试剂班氏(Benedict)试剂:
结晶硫酸铜17.3g无水碳酸钠100.0g
柠檬酸钠173.0g蒸馏水加至1000.0ml
先将柠檬酸钠及无水碳酸钠溶解于700m1蒸馏水中,可加热促其溶解。另将硫酸铜溶解于100m1蒸馏水中,然后将硫酸铜液慢慢倾入已冷却的上液内,并加蒸馏水至1000.0ml,过滤保存于褐色瓶内备用。
3.方法取班氏试剂5m1置于试管中,加尿液0.5m1(约10滴)充分混合,加热煮沸1—2min,静置5min后观察结果判断,管底出现黄色或黄红色沉淀者为阳性反应。黄色或红色的沉淀愈多,表示尿中葡萄糖含量愈高。亦可按下表估计葡萄糖的大约含量。
4.注意事项
(1)尿中如含有蛋白质,应把尿加热煮沸,然后过滤,再行检验。
(2)尿液与试剂一定要按规定的比例加入,如尿液加得过多,由于尿液中某些其他微量的还原物质,也可呈现还原作用而产生假阳性反应。
(3)应用水杨酸类,水合氯醛,维生素C及辞霉素治疗时,原内可能有还原物质而致假阳性反应。