鲤和锦鲤
败血症的确诊方法有哪些?
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根据发病季节、发病鱼种类及症状可初步确定疾病。主要诊断依据有以下几类。①7~9月发病,且同池鲤、锦鲤,或者鲫、鳊、鲢、鳙等养殖鱼类有两种以上的鱼同时发病,可初步判断。通常鲤、锦鲤、鲫、鳊先发病,随后鲢、鳙发病。在北方养殖地区主要是鲤先发病。②同池多种鱼同时发病并大量死亡,可初步判断疾病的发生。③病鱼出现口腔、颌、鳃
盖及鱼体两侧充血,或体表严重充血,眼眶、鳍基及鳃盖充血、眼球突出、肛门红肿等症状,部分鱼出现腹部膨大,轻压腹部,可从肛门流出黄色或血性
腹水。④肝、脾、肾、胆囊肿大充血,鲫肝脏可因严重病变而呈糜烂状,肠道因产气而呈空泡状,大部分鱼可见严重的肌肉充血。但急性发病死亡时可能症状不明显,一般几种鱼同时发病,首先要考虑出现细菌性败血病的可能。取发病鱼肌肉、内脏或腹水,压片或涂片观察可见大量运动的短杆状菌体,结合发病鱼种类、解剖观察可初步作出诊断。实验室诊断方法主要有以下几种。(1)细菌的分离培养 取肾、血液或肌肉,于营养琼脂、TSA或R-S培养基作画线分离.25~28℃培养24小时。气单胞菌可在营养琼脂和TSA上形成直径1~5毫米的圆形乳白色或淡黄色、光滑湿润微凸菌落;在R-S培养基上可形成黄色无黑色中心的菌落。如需对分离细菌进一步鉴定可采用API20E或其他细菌鉴定盒。(2)血清学诊断 挑取典型菌落,采用气单胞菌标准血清作玻片凝集试验。(3)致病因子检测采用脱脂奶平板法检测分离菌株的胞外蛋白酶活力,可作为菌株致病性的辅助判断。具体操作参看“致病性嗜水气单胞菌检验方法GB/T 18652-2002”。(4) PCR检测 目前,有关实验室开展了PCR法进行嗜水气单胞菌检测的研究,但未制订气单胞菌相关的PCR诊断标准。目前,气单胞菌已制订三个标准,分别为GB/T 18652 -2002《致病性嗜水气单胞菌检验方法》、SC/T 7201.3-2006《鱼类细菌病检疫技术规程第3部分:嗜水气单胞菌及豚鼠气单胞菌肠道病诊断方法》、SN/T 075-1999《出口食品中嗜水气单胞菌检验方法》。其中,SN/T 0751-1999仅列出了气单胞菌主要的细菌分离和检测方法,标准GB/T 18652-2002提供了R-S选择件培养基等常用培养基的配方及细菌分离方法,并提供了胞外蛋白酶的简易测定方法;标准SC/T 7201. 3-2006主要提供了从鱼类症状至细菌培养的诊断方法。
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