用自制药敏试纸进行肉鸡大肠杆菌病的药敏试验
-----
一 试验材料和方法 1 药敏试纸的制备 药敏纸片的制备:取杭州富阳特种纸厂生产的直径18cm的定量滤纸,用打孔器打成直径为6mm的圆形纸片,取100片圆形纸片放入清洁干燥的
青霉素空瓶中,瓶口以单层
牛皮纸包扎,120℃干燥灭菌2小时备用。 药液的制备:按兽药说明书上标明的治疗量比例配制药液。如规格为100g的抗菌物,包装说明兑水200千克,即用天平称药物1g加50mL的灭菌注射水置于灭菌器皿内,充分溶解后吸出1mL置于另一个灭菌容器中,再加入39mL的灭菌注射水。 药敏纸片的制作:将含有100片纸片的青霉素瓶内加入配置好的药液0.5mL,并翻动纸片,使各纸片充分浸透药液,同时在瓶口上记录药物名称,放37℃温箱内过夜,干燥后即密封,切勿受潮,置阴暗干燥处存放备用。 2 细菌的分离培养与鉴定 细菌的分离培养:采用常规法将细菌病料接种于麦康凯培养基上,37℃培养24小时。挑取单个菌落于普通琼脂平板上进行纯培养,37℃培养24小时。挑取单个菌落进行革兰氏染色、镜检,镜下可见大量散在的红色、中等大小、两端钝圆的无芽孢直杆菌,初步确定为大肠杆菌。 生化试验:取待检菌培养物分别接种在蛋白胨水、缓冲蛋白胨水、枸橼酸盐、
葡萄糖、乳糖、
麦芽糖、
甘露醇、蔗糖、
尿素琼脂、三糖铁琼脂、半固体琼脂培养基上,置37℃恒温箱中,培养24小时。结果显示:能发酵
葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇,产酸。尿素酶试验阴性,不产生H2S,有鞭毛,能运动。符合大肠杆菌的生化特性,证实确为大肠杆菌。 3 药敏试验将麦康凯培养基上认定的大肠杆菌菌落,无菌环境下用接种环挑出,均匀涂布在营养琼脂培养基上,同时等距离放置以下药敏纸片:
诺氟沙星、
环丙沙星、
头孢噻肟、
氨苄西林、多
粘菌素、
头孢曲松、氟苯尼考,置恒温箱中培养24小时,按以下标准判定药物敏感度。
畜牧导航:
养鸡资讯 鸡价格行情 养鸡技术 鸡病防治 饲养管理 养鸡问答