鸡李氏杆菌病——鸡病大全
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概 述鸡李氏杆菌病(Avian Listeriosos)又称禽
单核细胞增多症，是由李氏杆菌引起禽类的一种散发性传染病。鸡感染后主要表现为单核细胞增生性脑膜脑炎、坏死性肝炎和
心肌炎等症状。李氏杆菌还易感染家畜和人，重者表现为脑膜脑炎、
流产、
败血症和单核细胞增多，轻者表现为
结膜炎。鸡李氏杆菌病引起鸡散发性败血症，死亡率通常较低，但有时也可高达52％～100％。本病死亡率高低常与是否存在其他疾病混合感染有关。病 原李氏杆菌是一种球杆菌，大小为0.4～0.6μm×0.5～2μm，在
兔血琼脂培养基上生长可长成长达3～30μm的菌丝。普通琼脂培养出的菌体较体内和含1％
葡萄糖琼脂培养出的小，菌体一般为0.4～0.6μm。菌体多呈单个散在排列，有时呈V字形成对排列，有时呈短链排列。李氏杆菌在22℃和37℃时能生长，22～25℃时可形成4根鞭毛，具有运动性。而在37℃时菌体一般不长鞭毛或只长
单鞭毛，运动性减弱以至消失。本菌无芽胞、一般无荚膜，革兰氏染色阳性。但是，在血清
葡萄糖蛋白胨中能形成粘多糖荚膜。老龄培养物有时脱色为阴性，菌体染色常呈两极浓染，容易误认为是双球菌。本菌属需氧兼性厌氧菌，在普通琼脂上生长不好，在含血清或血液的琼脂上生长较好，在血琼脂上生长形成狭窄的β溶血环。当培养基中含1％葡萄糖及2％～3％
甘油时生长更佳。用亚碲酸钾琼脂37℃培养24h，呈圆形、隆起、湿润，直径平均为0．6mm的黑色菌落。此菌在麦康凯培养基上不生长。据报道，胰蛋白胨琼脂是培养和保存活菌的最好培养基，菌体在此培养基上具有纯净透明的特点，低倍镜下菌落有细腻的表面结构和蓝绿色的特殊光泽。肉汤培养呈均匀浑浊，有颗粒状沉淀，不形成菌环及菌膜。在半固体培养基上，细菌沿穿刺线呈弥散性生长，距琼脂表面数毫米处出现一个倒伞形生长区，呈松树状。李氏杆菌生长范围为pH5.6～9.8，当小于pH5.6时会死亡。此菌无耐酸能力，在糖发酵管中分离不到活菌。生长温度为25～42℃，一般选择30～38℃培养。动力观察的最佳温度为22--25℃培养。能发酵多种糖类，对葡萄糖、水杨苷，37"C24h内产酸，对乳糖、
麦芽糖、蔗糖、阿拉伯糖、山梨醇、甘油和糊精等3～10天产酸或不发酵，而对
棉籽糖、
肌醇、菊糖、
甘露醇等不发酵。甲基红、MR、VP、过氧化氢酶、七叶苷、接触酶阳性。
尿素酶、明胶、 H2S试验阴性。不还原硝酸盐，
石蕊牛乳在24h微酸，但不凝固。李氏杆菌对物理和化学因素抵抗力较强。在土壤、粪便、青贮饲料和干草内能长期存活。对碱和盐的耐受力较强，在20％
食盐溶液内可长期存活，2．5％苛性钠经20min细菌才能被杀死。70％酒精、2．5％石炭酸经5min杀死。60～70℃经5～10min可杀死。对
青霉素G、氨苄青霉素、
四环素、
氯霉素、
新霉素和
磺胺嘧啶钠敏感，其中敏感性最高的是氨苄青霉素。根据菌体O抗原和鞭毛抗原的不同，最初用凝集素吸收试验法曾查出本菌有4种抗原型(即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型)，其中有的可再分为若干亚型，Ⅰ型见于猪、禽、啮齿类，Ⅳ型见于畜禽，人类4个型都可致病，在国外Ⅰ型和Ⅳ型有商品化抗血清。后来又鉴定了12个血清型变种。
流行病学本病易感动物种类甚广，鸡、鸭、火鸡、鹅和金丝
雀等对本病易感，其中以各种不同年龄的鸡更易感，多呈败血经过。实验动物中，小鼠、家兔、豚鼠对本菌易感，皮下注射、肌肉注射易引起死亡；Anton试验表明，家兔或豚鼠点眼，24～36h后可出现脓性结膜炎。患病禽类和带菌者是本病的传染源。在禽类粪便和鼻分泌物中可检出此菌，但在蛋内不含此菌。本病的传播途径尚不完全了解。可通过消化道、呼吸道、眼结膜及受伤的皮肤感染。污染的饲料、饮水和吸血昆虫可能是主要的传播媒介。李氏杆菌可在土壤中存活1～2年，并能抵抗反复冻融，接触污染土壤也可感染本病。李氏杆菌在禽类粪便和鼻粘膜中均可短期存在，通常因接触病禽而迅速传播此病。本病的流行特点为散发型，偶尔呈地方性流行，发病率低，致死率高(52％～100％)。发病季节多在3～5月份，冬季亦有发生。各种年龄的禽类都易感，但幼龄比成年禽易感，发病也较急，多呈败血经过。在冬季缺乏青饲料、
营养不良，气候骤变，粘膜抵抗力低下，寄生虫或沙门氏菌感染、
维生素A和维生素B缺乏时，均可构成本病诱因。临床症状李氏杆菌自然感染的潜伏期很不一致，一般为2～3周。本病主要危害2月龄以下的雏鸡。发病前无明显临诊症状，突然发病。病初精神萎顿，羽毛粗乱，离群孤偶，下痢，食欲不振，鸡冠、肉髯发绀，病禽严重
脱水，皮肤呈暗紫色。随病程发展，两翅下垂，两腿软弱无力，行动不稳，卧地不起，倒地侧卧，两腿不停划动。有的则表现为无目的地乱跑、尖叫，头颈侧弯、仰头，腿部发生阵发性
抽搐，神志不清，最终死亡，病程1～3周。死亡率可高达85％以上。鸡的李氏杆菌病多与寄生虫病、鸡白痢、鸡
白血病等合并发生，可使症状复杂化。病理变化剖检可见败血症变化。脑膜和脑血管明显充血。心肌有坏死灶，
心包积液，心冠脂肪出血。肝脏呈
土黄色，肿大，并有黄白色坏死点和深紫色瘀血斑，质脆易碎。脾脏肿大，呈黑红色。腺胃、肌胃和肠粘膜出血，粘膜脱落呈卡他性炎症。有的腹腔内含有大量血样物。肾亦肿大、炎症变化。显微镜检查，在变性或坏死的区域可观察到大量的单核细胞浸润，坏死区及其周围可见革兰氏阳性杆菌。脑组织变化，神经胶质细胞增生以及大脑髓质形成血管套。在败血症时，常见肝化脓灶及心肌变性。肝、脑病变区以淋巴细胞、巨噬细胞和浆细胞浸润为特征。诊断鉴别1．病原学检查(1)涂片检查：采病死禽的血液、肝、脾、肾、脑
脊髓液、脑组织等做触片或涂片，革兰氏染色，镜检有呈单个、V字形或并列的革兰氏阳性小杆菌。(2)病原分离培养：取脑、淋巴结或肝等病料，接种于兔鲜血琼脂培养基、0.05％亚碲酸盐胰蛋白琼脂平板、0.1％葡萄糖血清肉汤、Martin琼脂斜面和Martin肉汤培养基中分离培养。在血琼脂上菌落周围有溶血环；亚碲酸盐琼脂上则呈黑色菌落；葡萄糖血清肉汤中呈均匀浑浊，有颗粒状沉淀，不形成菌环及菌膜；Martin琼脂斜面上可见乳白色、大小不一、圆形、边缘光滑、透明的小菌落；Martin肉汤中呈均匀浑浊，
管底有黄色沉淀。(3)病原体鉴定：取典型的单个菌落经纯培养后进行生化反应。李氏杆菌能发酵多种糖类，如葡萄糖、麦芽糖、七叶苷、果糖、
海藻糖和水杨素等产酸不产气。缓慢发酵乳糖、蔗糖、阿拉伯糖、半乳糖、
鼠李糖、糊精、山梨醇和甘油。不液化明胶，接触酶阳性，甲基红与VP反应阳性。不形成吲哚，不分解尿素，不能还原硝酸盐。(4)动物试验：病料制成悬液，以普通肉汤(如胰蛋白酶大豆肉汤，脑心浸液)以1：1稀释，用研钵或匀浆器匀浆。将悬液通过腹腔、脑腔、静脉注射兔子、小鼠或豚鼠，可很快引起试验动物败血死亡。点眼，可出现化脓性结膜炎，不久发生败血死亡。2.血清学诊断血凝抑制试验(HIA)、补体结合试验(CF)、琼脂扩散试验(AGP)和免疫荧光试验(IFA)等可用于本病的诊断。但由于李氏杆菌的自凝性，以及它与金色葡萄球菌、肠球菌等有共同抗原成分，易出现交叉反应，所以在运用血清学诊断时受到很多限制。在国外血清I型和Ⅳ型有商品化抗血清可用于血清型鉴定。3.单克隆抗体检测病原菌(1)应用Farber等报道的诊断李氏杆菌鞭毛抗原的单克隆抗体ELISA检测程序，该法可在2--3天内从病料中检出李氏杆菌，此法不能确定李氏杆菌的种间差异。(2)Buttman研制的15株李氏杆菌属特异性单克隆抗体构成的夹心ELISA检测方法，可于增菌后24h内报告阳性结果，最低菌浓度检出为5×105/ml。(3)焦新安等研制的C11、B11和B153株单克隆抗体，采用间接免疫荧光和ELISA的方法可快速检测出李氏杆菌。(4)范江洁于1995年研制的3株单克隆抗体(LJl0、ALM5和LBll)，具有种间特异性。用LJIOA做包被抗体和酶标抗体建立的夹心ELISA方法，测定人工模拟肉样至少可测出含5个/g细菌的样品，并在48h得出结果。(5)细胞株EM-TG1能稳定分泌抗单核细胞增生李氏杆菌的特异单克隆抗体，以此特异的单克隆抗体建立的夹心ELISA方法能于20～24h内检测出含8～10个/g(ml)细菌的样品。并可区分单核细胞增生李氏杆菌与非病原性李氏杆菌。4．应用分子生物学技术快速检测李氏杆菌的方法Datta等研制成功的β溶血性李氏杆菌特异的DNA探针，以核酸杂交和PCR方法快速检测单核细胞增生李氏杆菌，用核酸探针技术检测李氏杆菌，每克样品中污染一个细菌即可检测出来，十分敏感、特异，且缩短了检测时间。到目前为止，许多快速检测方法还处于实验室研究阶段，要能在实践中快速、特异、方便地检测此菌的方法仍有待于继续研究。防治措施预防李氏杆菌病，需加强饲养管理，禽舍定期消毒。本病对幼龄雏危害较大，因此加强育雏期的管理，提高机体抵抗力是预防本病的主要措施。同时，注意环境卫生，做好防疫消毒工作，及时发现清除死鸡，隔离治疗病鸡。场地、用具等用3％石炭酸、3％来苏儿、2％火碱、5％漂
白粉等严格消毒。注意周围的疫病信息，防止把病畜禽带入场内。发病后，要选用敏感药物。氨基青霉素和苄基青霉素G对本病菌有抑制作用。
链霉素有较好治疗作用，但易产生抗药性。有报道使用四环素粉剂，按0.06％～0.1％混入配合饲料内，连续用药3～5天。
庆大霉素注射液用生理盐水稀释后每只雏鸡5000～10000单位，肌注，每天1次，连续用药2～3天，有较好治疗作用。同时也要重视其他病毒性、细菌性疾病的合并感染，做好早期预防工作。
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