请问诊断鸡传染性法氏囊病时如何进行琼脂扩散试验?
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琼脂凝扩散实验主要包括以下几个要点:①抗原的制 备:取病鸡典型病变的法氏囊,研磨成悬液后,冻融3次,10 000转/分钟离心 30分钟收集上清液,用0.15%的福尔马林灭活,测定抗原的效价,然后将抗原 按一定的稀释倍数进行稀释后,分别与一定稀释倍数的阳性血清进行试验,血清 全部出现阳性反应时认为抗原合格。②琼脂凝平板的制备:配置1%的琼脂凝倒 人平板,用打孔器打成7孔
梅花样,其孔间距为3毫米,孔径为3毫米。③加样 及结果判定:中间孔放入已知的抗原,周围孔加入待检测的血清、阳性血清和阴 性血清,放于37°C温箱中,保持一定的湿度,经过24小时、48小时、72小时 观察反应结果,只要有沉淀线出现便可以判定为阳性反应,不出现沉淀线的为阴 性反应。如果在琼脂凝胶中加入3%的PEG,能提髙检出率。
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