病毒鸡胚培养绒毛尿囊膜接种法如何接种?
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选用孵化10?12天的鸡胚,通过照视,画 出气室及绒毛尿囊膜的发育面,在绒毛尿襄膜处(靠近胚胎无 大血管处)的蛋壳上用碘酒和酒精消毒后,锉成一个三角形或 方形裂痕,除去蛋壳造成“卵窗”,注意勿伤及壳膜。另在气室 顶部的蛋壳上钻一小孔,将蛋横卧于蛋盘(座)上,在“卵窗”处 滴无菌盐水1滴于壳膜上,以针尖将壳膜划破一小孔,不可伤 及下面的绒毛尿囊膜,然后用胶皮乳头置气室端的小孔处往外吸气,使盐水渗人壳膜与绒毛尿囊膜的裂隙内,此时绒毛尿囊膜即下陷与壳膜完全 分离,而形成人工气室。用注射器注 人0.05毫升病毒液于 绒毛尿囊膜表面(应于 1?2小时内接种,否则 干燥后不能使用),然后 用玻璃纸盖于卵窗上, 周围涂以熔化的石蜡密 封。同时封闭气室端小孔,将蛋横卧于蛋盘上,放在35?37°C温箱内,不要翻动,每 日向卵窗内检査1次。如病毒发育良好,则鸡胚通常在48? 96小时内死亡。
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