如何确诊猪布鲁氏杆菌病?
感谢大夫为我快速解答——该如何治疗和防治
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(一)细菌学检查用
流产胎儿胃内容物或阴道分泌物等材料制成菲薄的涂片,干燥、火焰固定后,用沙黄一孔
雀绿染色法染色,布鲁氏菌被染成淡红色、小球状杆菌,其他细菌或细胞为绿色或蓝色。也可观察其培养特性。小动物感染试验:应用豚鼠接种分离的布鲁氏菌,比用培养基分离可靠,因病料内细菌不多时,用培养基分离培养常不能生长。正式试验时,取子宫分泌物、乳汁流产胎儿胃内容物、羊水、精液或病变组织,制成混悬液等,给2只体重350 - 400g的豚
鼠皮下或腹腔接种,一般为0.5-1.0 - 2.0mL,接种后第2周开始采血,以后,每隔7-10d采血1次,检查血清抗体,如凝集价达1:5以上时,即认为是阳性反应,证明已感染了布鲁氏菌,此时,可从豚鼠心血中分离培养细菌,即使分离不到细菌,也可判为已感染布鲁氏菌。通常一只在接种后第三周剖杀,另一只在第6周剖杀,如见到鼠蹊淋巴结与腰下淋巴结肿大,脾肿大、表面粗糙,有结节状病灶,肝脏有灰白色细小平坦的坏死小结节,更可进一步证实试验的阳性结果;若注射的豚鼠不发病,剖检无病变,脏器分离培养阴性,可报告阴性。如为公豚鼠,腹腔接种时,可引起睾丸炎。如在接种后第3个月末,豚鼠不发病,未死亡,血清反应仍阴性,可报告为阴性。(二)血清学试验1.凝集反应 动物感染布鲁氏菌的4-5d后,血液中即出现凝集素,随后凝集滴度逐渐增高,能持续1-2年或更久,以试管凝集反应检查时,猪在1:50达“++”或“++"以上者,判为阳性反应,在1: 25达“++”时为疑似反应。大群检疫时,为提高效率,可用玻板凝集反应,
猪血清在0.04mL处凝集,判为阳性反应;在0.08mL处凝集时,判为疑似反应。判为可疑的猪,3-4周后应采血重检,如仍为可疑反应。可按以下情况来确定,即该群中既无本病的流行病情况发生,也无临床病例出现,血检也无阳性时,则可判为阴性反应。2.虎红平板凝集反应 虎红布鲁氏菌有色抗原呈酸性,且具有缓冲作用,并能抑制引起非特异性反应的IgM的活性和增强特异性IgG的活性,使反应的敏感性提高,特异性优于常规试管凝集反应。检验时,取被检血清与虎红抗原各0.03mL,滴加于平板上混匀,放置4 - 10min观察结果二只要有凝集现象出现,即可判为阳性反应。3.其他方法‘荧光抗体染色法、间接炭凝集反应、间接红细胞凝集反应、协同凝集试验、特异性花结吸附染色、酶标SPA染色、二巯基
乙醇(2-ME)凝集反应、补体结合反应、细胞免疫检查法、乳汁环状反应、热凝集反应、凝胶电泳法等均可用于
布鲁氏菌病的诊断。阎守敦等(1990)应用凝胶电泳法来鉴别布氏杆菌的人工感染和疫苗接种。近年来,间接血凝试验、抗球蛋白(Coombs)试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光抗体法、DNA探针以及聚合酶链式反应(PCR)等新的方法逐渐被用于本病诊断或检疫。
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