猪繁殖与呼吸综合征的诊断
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猪繁殖与呼吸综合征（PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种猪繁殖和呼吸障碍的传染性疾病。母猪表现为
流产、
早产、死产、木乃伊胎及弱仔等。仔猪和育肥猪则表现为呼吸困难。仔猪发病率和死亡率很高，对养猪业构成了重大危害。临床症状妊娠后期母猪突然出现
发热（可高达40℃以上)，精神沉郁，
嗜睡，食欲减退，呼吸困难，有些母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔。仔猪临床症状明显，早产的仔猪当天或几天内死亡。初生仔猪发热，喜扎堆，拉稀，多呼吸困难，呈腹式呼吸。断奶仔猪主要表现呼吸困难、
咳嗽、厌食，耳部及腹下皮肤发红，严重的耳尖发绀，病猪消瘦、贫血，最后死亡。耐过的仔猪表现生长停滞，成为僵猪。发病仔猪死亡率较高，达80%以上。病理变化剖检典型死亡病猪，主要表现为血液稀薄呈水样，淋巴结出血，
肺脏水肿、充血、出血，有坏死灶，主要表现为间质性
肺炎;肾肿大，有小出血点;肝脏肿大呈黄褐色;肠粘膜出血，肠系膜淋巴结水肿;部分在喉头、心外膜、膀胱粘膜有点状出血。流产胎儿及弱仔剖检，可见头部、皮下水肿，胸腔内积有大量清亮液体。根据上述症状和剖检变化初步诊断为猪繁殖与呼吸综合征。为了进一步确诊，又进行了下列实验室检查。实验室诊断分子生物学诊断我们采用RT～PCR的诊断方法：取PRRS病料 （肺、淋巴结)组织研磨：应用TRIZOL细胞裂解液，按常规方法提取RNA;用下游引物进行反转录;用反转录产物cDNA进行PCR扩增（上游引物5′GCGGATCCATGCGATCTAACAAC3′;下游引物5′AGCGCGAGTCAGGCTAGGGAGGA3′)，PCR反应条件为：94℃预变性3min，94℃变性1min，53℃退火1min，72℃延伸1min，30个循环后，72℃再延伸10min。反应结束后，取PCR产物5μL在1%的琼脂糖凝胶中进行电泳。结果扩增出大小为417bp左右的目的片段，与预期扩增417bp大小的片段相符。血清学诊断我们使用华中农业大学动物医院动物病毒室研制的猪蓝耳病抗体检测试剂盒检测了10份病
猪血清。具体方法是将病猪血清用样品稀释液按1∶40稀释后，每孔加100gL;再用稀释液按1∶4稀释阴、阳性对照，各设2孔，每孔100μL;另设一孔空白对照，加100μL稀释液。37℃温育30min，甩掉板内溶液，用洗涤液洗涤5次，每孔加酶标二抗100μL，37℃温育30min。然后洗涤，加入显色液显色。测得待检样品的OD630值分别为：0.44， 0.46，0.50，0.48，0.46，0.52，0.55，0.49，0.53，0.47。测得值大于0.42就可判定为阳性，因
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母猪出现死胎，流产早产，木乃伊
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接种疫苗
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