断乳猪多系统消耗综合征的病原学介绍?
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1 病原学1.1 形态及分类 圆环病毒是一种小的、二十面体对称、无囊膜、单股环状DNA病毒，直径14～17 nm，是目前发现的最小的动物病毒。PCV2属圆环病毒科、圆环病毒属。1974年，德国人Tischer发现，在多株连续传代的PK-15细胞中存在一种类似小RNA病毒的圆形小颗粒病毒，该病毒可持继感染PK-15细胞，但不引起CPE。1982年，他证实并命名为猪圆环病毒。1997年，Allan用从PMWS病料中分离到的病毒接种未感染的 PK-15，结果分离到圆环病毒，称它为PCV2，而将以前从 PK-15中分离到的圆环病毒称为Ⅰ型(PCV1)。目前所分离到的PCV2各毒株，用单克隆或多克隆抗体检查，在抗原上都“相似”。在Genbank上发表的各毒株的同源性介于91.1%～100%，AA保守性在90.2%～100%之间，相对较保守。1.2 理化性质 关于PCV2理化性质的报道较少。PCV在CSCL中的浮密度为1.37 g/cm3，沉降系数为52 S。PCV对外界环境及各种
消毒药抵抗力较强，在pH值为3 的酸性环境中很长时间不被灭活，56 ℃不能灭活，70 ℃能存活15～30 min，对苯酚、季胺类化合物、氢氧化钠和氧化剂等较敏感[4,5]，对氯仿不敏感。美国爱阿华州大学对11 种消毒药品所作的独立的研究表明，Virkon S(1∶100)对PCV2及其协同抗原PPV有很强的杀灭作用[6]。1.3 PCV2的分子生物学特征 PCV2有两种基因组，一种1767，一种1768，目前分离到的各毒株间同源性均在95%以上。PCV1与PCV2同源性为68%。PCV2共有11 个阅读框(表1)，这些阅读框表现为基因重叠，从而充分利用了PCV有限的遗传物质。11 个阅读框中 ORF1、5、7、10 的‘5―3’方向相同，ORF2、3、4、6、8、9、11 的‘5―3’方向相同，有学者认为 ORF1、2、3、6、7有一定的同源性，其余ORFS无任何的同源性。ORF2编码234 个AA，编码蛋白是PVC2囊膜的主要结构成分，Liu Q等用免疫荧光方法和位点突变分析方法研究了PCV2-ORF2在细胞中的定位，发现ORF2N端第12～18 个，第34～41 个AA域在PCV2在细胞核内定位中起着重要作用。Truong等利用免疫相关性B-细胞表位，借助于ELISA确定了ORF2编码蛋白(CAP)的两个抗原表位，分别位于其所编码的AA的69～83 处和117～131处，这两处对于CAP是特异的。所以他将ORF2抗原表位作为自然感染猪及试验
猪血清学检测的标志 。Liu Q等将ORF2基因连接到MBP-His(8)-TAG基因3’端，在大肠杆菌中表达了ORF2融合蛋白，该融合蛋白可以与PCV2抗血清反应，这表明可以用ORF2 来区分PCV1与PCV2。将PCV2的ORF2克隆到杆状病毒表达载体上，在昆虫细胞内以该基因进行表达，表达产物的分子量为30 Kd，与从纯化的病毒粒子中检测到的蛋白大小相似，在电镜下能观察到ORF2蛋白可以自我装配成病毒衣壳样颗粒。ORF1是最大的阅读框，编码315 个AA，编码病毒的复制蛋白(REP)，分子量大小为37 Kd，与病毒的复制转录有关[7,8]。1.4 PCV2的复制方式及培养特性 研究证实，PCV的复制方式为滚环式，先复制出一个RF(复制型)，然后由双链RF转录和编码蛋白。PCV2能在PK-15细胞上生长，不能引起细胞病变。感染的PK-15细胞内含有许多胞浆内包涵体，少数感染细胞内有核内包涵体。Allan(1997)报道，在接种PCV的PK-15细胞培养物中加入300 mm的D-氨基
葡萄糖-HCL作用30 min，可以促进PCV的复制。PCV不能在原代胎
猪肾细胞、恒河猴肾BHK-21细胞上生长。有报道，PCV也能在Vero细胞及其他猪源代细胞糸上生长。
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圆环病毒2型
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圆环病毒2
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