猪
口蹄疫鉴别诊断
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1． 病毒 分离鉴定 病毒 分离鉴定的首选病料是未破裂或刚破裂的水疱皮(液)，对新发病死亡的动物可采取
脊髓、扁
桃体、淋巴结组织等。将病料悬液冻融2次，4℃过夜(至少4h)浸毒。以3000r/min离心15min，除菌后取上清接种细胞。或加1/3体积氯仿混合摇振数分钟，以3000r/min离心15min，取上清液装入试管中，加棉塞，4℃过夜，氯仿挥发后，接种单层细胞。每份样品接种2～4瓶细胞，另设对照2～4瓶。37℃静止培养48～72h。每天观察记录，对照细胞形态应基本正常或少有衰老。接种了样品的细胞如出现FMD病毒典型病变(CPE)，要及时取出并置-30℃冻存。无CPE的细胞瓶要观察至72h，其后置于-30℃冻存作为第1代细胞/病毒液再
盲传，至少盲传3代。凡出现CPE的样品判定为阳性，无CPE的为阴性。为了进一步确定分离病毒的血清型，将出现CPE的细胞/病毒液用间接夹心ELISA等检测方法定型。 2．补体结合试验(CFT) CFT是根据抗原-抗体系统和溶血系统反应时均有补体参与的原理设计的，以溶血系统作为指示剂，限量补体测定病毒抗原。当病毒抗原与血清抗体发生特异反应形成复合物时，加入的补体因结合于该复合物而被消耗，溶血系统中没有游离补体将不发生溶血，试验显示阳性。 3．病毒中和试验(VNT) 口蹄疫病毒血清型划分的依据是型间无交叉免疫保护性，VNT是型别鉴定的重要方法之一，其检测结果可靠，缺点是动用活毒，且用时较长，只能在专门的实验室中进行，无法推行于普通实验室。 4．反向间接血凝试验 FMD反向间接血凝试验是将口蹄疫病毒抗体以化学方法偶联于醛化的
绵羊红细胞上，当贴附于血细胞上的抗体与游离的抗原相遇时，形成抗原抗体凝集网络，绵羊红细胞也随之凝集，出现肉眼可见的红细胞凝集现象。反向间接血凝试验可作为FMD病毒抗原型别鉴定的初步方法，该方法简便、快捷，适合于田间使用。目前该法仅在前苏联国家和我国使用，西方国家很少应用，也未列入国际推荐方法。 5．反转录-聚合酶链反应(RT-PCR) PCR具备实验诊断所要求的最重要的3个要素：①敏感，可将原样品放大上百万倍，使原本少得难以探察到的(Pg级)样本扩增到能在紫外灯下肉眼可见；②特异，核酸片段与引物间的序列互补，使反应呈高度特异；③操作简单快速。RT-PCR检测的目标物是FMD病毒的RNA，通常以病毒材料为被检样品，可对各种动物组织和细胞来源的病毒材料进行检测，扩增到的PCR片段测定核苷酸序列后，可以确定所属的基因型和基因亚型，进而追踪疫源。 6．间接夹心ELISA 国际口蹄疫参考试验室建议，检测口蹄疫病毒血清型应优先采用间接夹心ELISA，OIE和FAO也一致推荐使用该方法定型诊断。 猪口蹄疫抗体检测 通过检测动物体液中(主要是血清)特异性抗体，可对FMD病毒感染与免疫状况做出诊断，通常采用病毒中和试验和ELISA方法，这两种方法也是国际贸易中指定方法。FMD病毒抗体检测可用于以下几个目的：①诊断急性感染，用同一试验检测急性期和康复期
猪血清样品，血清抗体阴转阳或抗体滴度急剧上升表示发生了感染，但诊断的前提是猪无疫苗接种史；②证实猪未被感染，用于国际贸易；③在
流行病学调查中检测感染情况；④支持疫病扑灭计划和后期检测；⑤接种疫苗后效价测定。值得提示的是免疫猪有时抗体滴度很低，甚至检测不到抗体，但攻毒后仍能保护。 猪口蹄疫新诊断技术进展 FMD诊断检测技术正在不断地改进和创新，已从血清学诊断技术领域扩展到了分子生物学诊断技术领域。这些新技术的最大优点体现在简便、快速、精确、灵敏以及高通量化。
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根据临床症状和流行态势
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根据发病症状
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