种鸡减蛋综合症的琼脂扩散试验是怎样的
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抗原的制备可将种毒经尿囊腔接种于13—14日龄鸭胚,接种后96小时收集鸭胚尿液,经3000转/分离心30分钟,取上清,加入甲醛使终浓度为0.2%。置37度温箱中作用48小时后,经40 000转/分离心2小时,弃上清,沉淀物按原液量的1/20加入灭菌生理盐水,用注射器充分吹打溶解,再经3 000转/分离心20分钟,取上清。将沉淀物再加少量灭菌生理盐水充分吹打离心。将每次离心的上清液混合在一起,用灭菌生理盐水补充到尿液的1/10量,作为琼扩抗原。琼脂板的制备,是在100毫升pH5。6~6.4的PBS中加入
氯化钠8克、琼脂糖1克、10%的硫柳汞0.1毫升,充分煮沸后,每个平皿注入18毫升,待琼脂自然凝固后,置普通冰箱中保存备用。试验时打孔经4毫米、孔间距3毫米的7孔
梅花孔,中心孔加抗原,周围孔加待检血清、阴性血清和阳性血清,置3713温箱中,保持一定湿度,经24—48小时观察结果。:抗原与待检血清间出现特异性沉淀线者,判为阳性
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