鹅痘的确诊方法有哪些?
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鹅痘在禽痘病例中的发生是不多见的,但随着规模化饲养后,此病将有可能引起流行,因此确诊具有一定的重要性。(1)病毒分离①病料采集及处理。分离病毒的病料最好采自新形成的痘疹病灶。应用灭菌的剪刀切取痘疹病灶,深部达上皮组织。将病料浸泡于每毫升含有
青霉素、
链霉素各1万单位灭菌生理盐水,或Hank's液30~60分钟。取出后用剪月剪碎,用乳钵或组织研磨器研磨后加入灭菌生理盐水制成1:5悬液,经3 000转/分,离心30分钟。取上清液按每毫升加入青霉素、链霉素各1 000单位,置37℃温箱中作用60分钟。取少许液体接种于鲜血琼脂培养基和厌氧肉汤培养基,无菌生长,作为病毒分离材料。②鸡胚接种。用4~6枚发育良好的10日龄鸡胚,每胚绒尿膜接种上述病毒分离材料0.1毫升。接种后将鸡胚置37℃继续孵育,观察5~7天,检查绒尿膜上是否出现灰白色灶状痘斑。如初代接种有出现不典型病变时,可继续传代。(2)病毒鉴定 ①电镜检查。取痘疹病料制成超薄切片,或感染鸡胚绒尿膜上的灰白色灶状痘斑病料制成超薄切片做电镜检查,见有180纳米×320纳米大型病毒颗粒。包涵体检查:取痘疹病料或感染鸡胚绒尿膜病灶,制作切片,用
苏木素和伊红染色,在上皮细胞的胞浆内可以见到嗜酸性包涵体。②血清学鉴定(琼脂扩散试验)。琼脂板的制备:由1%优质琼脂或1%琼脂粉、8%
氯化钠和0.01%硫柳汞配制而成。抗血清:取自然康复或人工感染鹅康复的血清,以及鸡痘免疫血清。被检抗原:将痘疹病料或感染鸡胚有病变的绒尿膜制成1:2~1:3乳剂,经离心取上液作为被检琼扩抗原。方法:与小鹅瘟方法相同。一般在24~48小时内出现1~2条沉淀线。
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根据临床症状
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根据临床症状
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