鹅鸭疫里默氏杆菌病的确诊方法有哪些?
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(1)微生物学检验病料采集:细菌学检查可取脑、肝、脾组织触片或心血、
心包液涂片,进行革兰氏或瑞氏染色,观察细菌形态。同时取病料进行病原的分离培养,观察其培养特性。急性期且未使用过抗生素的病例,或死亡病例较适宜于进行细菌镜检和分离培养。脑和心血中最易分离出病原菌,约80%甚至90%左右的病例脑组织中可分离到病原菌。约60%的病例心血中可分离到病原菌,约10%左右的病例肝、脾组织可分离到病原菌。另外,还可从气囊、骨髓、肺、呼吸道以及病变的渗出物中分离到病原菌,疾病急性期的鼻腔分泌物中亦可分离到病原菌。分离培养:应用血液琼脂或巧克力琼脂,在5%-10%的C02条件下37℃培养48小时,生长出直径约1~2毫米、圆形、光滑、突起的奶油状的菌落。选择纯培养物进行生化试验,鉴定其主要生化特性是否与鸭疫里默氏杆菌相符合。(2)血清学检验应州标准的分型抗血清,可进行玻板或试管凝集试验,以及琼脂扩散试验鉴定血清型。由于鸭疫里默氏杆菌的血清型较多,且不同血清型之间缺乏抗原交叉反应,这给本病血清学检测的推广和应用带来困难。以防漏检,检测抗原时应用拥有各型标准抗血清,检测抗体时,又应拥有各型标准菌株作为抗原。目前主要的血清学检测方法有:①凝集试验。a.快速玻板凝集试验。将各型标准抗血清分别滴加于玻片上,取待检菌株丁血清中混匀后在3~5分钟内观察凝集结果,即可判定血清型。b.试管凝集试验。将标准抗血清倍比稀释,待检菌株经纯培养后,用0.3%的福尔马林液PBS洗涤并制成悬液,调节OD525至0.2,抗血清与抗原各0.5毫升混合,37℃作用18小时后观察结果。②琼脂扩散试验。待检菌株纯培养后,经沸水煮1小时或高压121℃1小时制成抗原。操作按常规方法进行。③间接血凝试验。各型标准菌体作为检验抗原,致敏醛化的
绵羊红细胞。将待检血清倍比稀释,与致敏红细胞37℃作用1~1.5小时后判断结果,以50%的致敏红细胞凝集,判为阳性。(3)动物接种将细菌分离培养物经肌肉、静脉或腹腔等途径接种。用于接种的易感雏鹅应来源于未发生过鸭疫里默氏杆菌病的饲养场,并且适龄、健康未使用过各类鸭疫里默氏杆菌疫苗。接种后观察是否出现本病特征性的临诊症状及病理变化,同时接种豚鼠、家
兔和小白鼠,本菌能致死豚鼠,但不致死家兔和小白鼠。
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微生物学检验
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实验室检测
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