鹅鸡法氏囊病毒感染症的确诊方法有哪些?
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鹅法氏囊病是一种新发现的病毒性传染病,要确诊必须进行病毒分离鉴定及血清学诊断。(1)病毒分离①病料采集与处理。采集具有典型病变的患雏鹅或死亡鹅的法氏囊组够{,剪碎磨细加入灭菌生理盐水或PBS液制成1:5 --1:10的悬液,经3 000转/分,离心30分钟。吸取上清液,按每毫升加入
青霉素、
链霉素各1 000单位混匀后置4~8℃水箱中作用2~4小时,或37℃温箱中作用30分钟,经细菌培养为无菌者作为病毒分离材料。②禽胚接种。将病毒分离材料接种4~6枚12日龄易感鹅胚,每胚绒尿腔0.2毫升,或接种4~6枚10~11日龄SPF鸡胚,每胚绒尿腔0.2毫升。通常于72~120小时死亡。死亡胚冷却后吸取绒尿液,经无菌检验后冻结保存做进一步鉴定。③病毒鉴定。鹅及鸡接种:鹅胚绒尿液毒或鸡胚绒尿液毒接种4~6只25~35日龄雏鹅或4~6只30日龄左右SPF鸡,每只皮下或肌肉注射0.5毫升。通常在接种后48小时左右开始出现症状,72~120小时出现死亡。死亡雏鹅和雏鸡均具有法氏囊病典型病变。保护试验:用鸡法氏囊病高免抗血清接种4~6只25~35日龄易感雏鹅,每只皮下或肌肉注射2毫升。血清注射后6~l2小时接种鹅胚或鸡胚分离毒,每只皮下注射0.2毫升。另4~6只注射生理盐水代替血清作为对照组,观察10天。血清组鹅全部健活,后者发病死亡,并具有典型病变。琼扩试验:琼扩被检抗原制备,取患病鹅典型病变的法氏囊组织,剪碎磨细用生理盐水做1:5稀释制成匀浆在冰箱内反复冻融3~5次,经1 000转/分,离心10分钟。取上清液加入等量氯仿振摇30分钟后,经3 000转/分,离心10分钟。取上液加入0.01%硫柳汞防腐,冻结保存作为被检抗原。抗血清:用已知鸡法氏囊病高免血清、本病鹅康复血清或高免血清。方法:按常规方法进行交叉琼扩试验。结果,被检抗原应与已知鸡法氏囊抗血清和本病鹅的抗血清明显阳性反应。鸡法氏囊病标准抗原与鸡法氏囊病抗血清和鹅抗血清均显阳性反应。
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实验室检测确诊
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