1 试剂
1.1 丙烯酰胺溶液
取丙烯酰胺14g，双丙烯酰胺0.367g，加蒸馏水至50ml。
1.2 缓冲液
Ph7.2，0.2mol /L PB-0.2%SDS：取NaH2PO4·2H2O17.8g,Na2HPQ4·12H2O103g,SDS4g，加蒸馏水至2000ml。
1.3 样品结合液
取10%SDS4ml,0.2mol/L PB0.2ml，甘油10ml，加蒸馏水至20ml。
1.4 电极缓冲液
取上述1.2项缓冲液稀释1倍。
1.5 固定液
取甲醇400ml，冰醋酸70ml，加蒸馏水至1000ml。
1.6 染色液
取考马斯亮蓝2.5g，溶于500ml甲醇中，加冰醋酸70ml，再加蒸馏水至1000ml。
1.7 脱色液
取冰醋酸70ml，甲醇50ml，加蒸馏水至1000ml。
1.8 干燥液
取甘油30ml，甲醇200ml，加蒸馏水至1000ml。
2 操作
2.1 样品处理
取一定蛋白质浓度的样品0.1ml，加样品结合液0.1ml，100℃翥沸1～2分钟，或37℃2小时，冷却。
2.2 凝胶板制备
按下列比例制备所需量凝胶溶液∶0.2mol /L PB∶丙烯酰胺溶液∶水∶1.5%过硫酸铵=2∶1∶0.8∶0.25。最后加1～2滴四甲基乙二胺（TEMED)，混匀后立即将胶液加入电泳槽的玻璃板间，要避免产生气泡。
2.3 加样
于每一样品孔内加入已经处理过的样品25μg蛋白。
2.4 电泳
电泳条件为每个www.lindalemus.com/Article/样品孔的电流恒定为2～3mA。当溴酚蓝电泳至底部时停止电泳。
2www.med126.com.5 固定
将电泳后的胶板放入固定液中，过夜。
2.6 染色及脱色
于染色液中染色1～2小时，然后置脱色液中进行脱色，直至底色成为无色为止。
2.7 干燥保存
用适宜方法干燥。
3 结果计算
将干燥前或后的胶板用扫描仪于575nm或520nm处对每一样品进行扫描，得出（或计算出)样品中F（ab)2的百分含量。
