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您现在的位置: 医学全在线 > 中医理论 > 中医书籍 > 正文:人白蛋白残留铝离子会计师测定(铝试剂法)
    

中国生物制品规程:人白蛋白残留铝离子会计师测定(铝试剂法)

1 试剂1.1 盐酸(1∶9)10ml浓盐酸加90ml蒸馏水。1.2 0.2%铝试剂溶液0.2g铝试剂加100ml蒸馏水溶解。1.3 10%醋酸铵溶液称取10g醋酸铵(AR),加蒸馏水溶解并稀释至100ml。1.4 准铝溶液(10μg铝/ml)精密称取明矾[KAl(SO4)2·12H2O](AR,无风化)0.3518g,加1.5m…

1 试剂

1.1 盐酸(1∶9)

10ml浓盐酸加90ml蒸馏水。

1.2 0.2%铝试剂溶液

0.2g铝试剂加100ml蒸馏水溶解。

1.3 10%醋酸铵溶液

称取10g醋酸铵(AR),加蒸馏水溶解并稀释至100ml。

1.4 准铝溶液(10μg铝/ml)

精密称取明矾[KAl(SO4)2·12H2O](AR,无风化)0.3518g,加1.5mol/l HCl8ml,加蒸馏水到500ml,为40μg铝/ml的标准浓溶液。临用时精确量取2.5ml标准铝浓溶液于10ml容量瓶,用蒸馏水稀释至刻度,为10μg铝/ml标准液。

1.5 4mol /L NaOH溶液

称取40g NaOH(A.R),加蒸馏水溶解并稀释至250ml。

1.60.5mol /L NaOH溶液

取50ml 4mol /L NaOH加蒸馏水至400ml。

1.70.1mol /L HCl溶液

1ml浓HCl(A.R)加蒸馏水至120ml。

取溴麝香草酚蓝0.1g,加0.05mol/L NaOH3.2ml,溶解,再加水衡稀释至200m。

2 操作

2.1样品

精密量取1ml样品于凯氏消化瓶内,加1ml浓H2SO4于电炉上消化。从浓的白烟生成到白烟基本消除,再继续消化15分钟,稍冷,向消化瓶中www.lindalemus.com/kuaiji/另入适量H2O2,于电炉上继续消化至无气泡生成,消化液呈无色透明。待冷后,用4mol/LNaOH中和消化液(10%白蛋白加5ml4mol/LNaOH)。然后将消化液转移至10ml容量瓶中,并用蒸馏水稀释至刻度。

取2ml稀释液于25ml带塞比色管中(取2管)。另取2ml稀释液于50ml三角烧瓶中,向三解烧瓶中加2滴BTB指示剂,如变蓝,用0.1mol/LHCl滴定至黄绿色;如为黄色就用0.5mol/LNaOH滴定至黄绿色或浅蓝色。用此方法将2ml样品或对照稀释液的pH值调至5.5~8.5,按此量将比色管内的稀释液pH值调至5.5~8.5。加1mlHCl(1∶9),加蒸馏水使其总体积不超过17ml,加0.2%铝试剂1ml、10%醋酸铵溶液5ml,加蒸馏水至25ml。加塞摇匀。放置20分钟后,用530nm波长测其吸收度(OD值)。同时做空白对照,用1ml蒸馏www.lindalemus.com/Article/水代替1ml样品,其余操作同样品。

2.2 标准曲线

精密量取标准铝溶液(10μg铝/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于25ml带塞比色管中,铝含量分别为0、2、4、6、8、10μg,从加1mlHCl(1∶9)起同样品管。

3 计算

3.1 由标准曲线查出,或从标准计算出的直线回归方程中求出对照管和样品管的铝含量(A)。

3.2 根据中和用去的碱量计算出2ml样品和对照稀释液中含4mol/LNaOH的ml数。

3.3 根据2ml对照稀释液含的4mol/l NaOH量和含铝量,计算出每ml4mol/l NaOH含铝量。

3.4 根据每ml4mol/l NaOH含铝量和2ml样品稀释液中含4mol/l NaOH的ml数,计算出2ml样品稀释液中,中和用的4mol/l NaOH含铝量(B)。

3.5 计算样品中含铝量

样品中含铝量(μg/g蛋白)=[(A-B)÷2×10]÷蛋白含量(g/ml)

附注

1.铝试剂不仅能与某些金属离子形成有色的络合物,同时也会由于溶液中H+浓度的改变而产生颜色的变化。因此测定时,要严格控制溶液的pH值在5.0左右,样品和标准的pH值一致。

2.铝试剂避光保存。

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