网站首页
开云app安装不了怎么办
药师
护士
卫生资格
高级职称
住院医师
畜牧兽医
医学考研
医学论文
医学会议
开云app安装
网校
论坛
招聘
最新更新
网站地图
中医理论中医临床诊治中医药术语标准中国方剂数据库中医疾病数据库OCT说明书不良反应中草药图谱药物数据药学下载
您现在的位置: 医学全在线 > 中医理论 > 中医书籍 > 正文:附录 抗-HBs效价测定(RIA法)
    

中国生物制品规程:附录 抗-HBs效价测定(RIA法)

1 试剂1.1 用(人)HBsAg(亚型ad,ay)包被的聚乙烯珠子。1.2 125I标记的(人)HBsAg(亚型ad,ay)试液。1.30.01mol/L Tris缓冲液,内含4%牛血清白蛋白,pH7.4。1.4 抗-HBs参比标准品,含抗-HBs10~160mIU /ml。采用四点法 或www.lindalemus.com五点法。2 测定先将检…

1 试剂

1.1 用(人)HBsAg(亚型ad,ay)包被的聚乙烯珠子。

1.2 125I标记的(人)HBsAg(亚型ad,ay)试液。

1.30.01mol/L Tris缓冲液,内含4%牛血白蛋白,pH7.4。

1.4 抗-HBs参比标准品,含抗-HBs10~160mIU /ml。采用四点法 或www.med126.com五点法。

2 测定

先将检品按估计效价稀释成不同倍数,使其cpm计数落在参比标准品直线范围内。一般10%肌注丙种球蛋白可进行10、20、40倍稀释。乙型肝炎免疫球蛋白可进行500、1000、2000倍稀释。正式试验时根据预试结果调整稀释倍数。预试验用3个稀释倍数,正式试验用2个稀释倍数。

2.1 各取0.2ml参比标准品及不同稀释倍数的检品,加入反应盘的不同孔中。预试验时每个稀释倍数检品加1孔,正式试验每个稀释倍数检品加3孔。于每孔中小心加入一个HBsAg包被珠子,盖上密封胶纸,振荡或轻拍反应盘,排出气泡,并使珠子全部浸入液体中,置室温(15~www.med126.com30℃)结合18小时(16~20小时)。

2.2 去除胶纸,吸出孔内液体,每珠用4~5ml蒸馏水洗3次,最后一次尽量将水吸干。

2.3 于每孔中加0.2ml125I标记HBsAg试液,轻拍反应盘,排出气泡,并使珠子全部浸入液体中,盖上新的密封胶纸,置室温结合4小时(或45℃水浴2小时),去除胶纸,按2.2项冲洗。

2.4 用纸试管架将珠子从反应盘转移至塑料管中,其编号应与反应盘孔号一致。将反应管置适宜的井型γ计数器中计数cpm,洗后24小时内均可使用。

3 计算

3.1 先救求出参比标准品和各稀释倍数检品的平均cpm计数,以参比标准品抗-HBsmIu /ml为横座标,以cpm计数为纵座标在座标纸上作图,连接各点成一直线。

3.2 从标准直线上查出各稀释倍数检品的cpm计数点,并从此点向下作一垂直线,在横座标上查出抗-HBs mIU,再乘以检品稀释倍数,除以1000,求出2点或3点的平均值即为该检品的抗-HBs IU/ml。

4 注意事项

4.1 预试验时应按试剂盒要求做阳性和阴性对照。

4.2 冰箱保存的试剂,用前应先于室温内放置1小时。

4.3使用不能自动减本底的γ计数器时,应减本底后再计算。

4.4 所有测定操作应遵守同位素实验室安全防护制度。

...
关于我们 - 联系我们 -版权申明 -诚聘英才 - 网站地图 - 医学论坛 - 医学博客 - 网络课程 - 帮助
医学全在线 版权所有© CopyRight 2006-2046,
皖ICP备06007007号
百度大联盟认证绿色会员可信网站 中网验证
Baidu
map