C-肽测定的主要用途包括：
①最主要用于评估空腹低血糖。某些β细胞瘤病人，特别是有间歇性胰岛素分泌过多时，检测胰岛素可正常但C-肽浓度都升高。当低血糖是由于胰岛素注射所致时，胰岛素水平会很高而C-肽降低，这是因为C-肽不存在于药用胰岛素中，并且外源性胰岛素会抑制β细胞分泌功能。
②评估胰岛素分泌。基础或刺激性C-肽水平可用以评价患者胰岛素分泌能力和分泌速度。如糖尿病患者在用胰高血糖素刺激后C-肽大于1.8ng/ml可能是2型糖尿病，而C-肽＜0.5ng/ml时可能是1型糖尿病。因此C-肽浓度对鉴别1型和2型糖尿病具有一定价值。
③监测胰腺手术效果。在全胰腺切除术后，检测不到血清C-肽，而在成功的胰腺或胰岛细胞移植后C-肽浓度应增加。
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