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药师资格考试药物分析西药分析—缩宫素生物检定法 | |||||
来源:医学全在线 更新:2007-5-16 考研论坛 | |||||
标准品溶液的配制 迅速精密称取垂体后叶标准品适量,注意避免吸潮,先加少量0.25%醋酸溶液,仔细研磨,移置硬质大试管中,再精密加0.25%醋酸溶液使成每1ml中含缩宫素1单位的溶液。管口轻放一玻璃塞,浸入沸腾的水中,时时振摇,加热5分钟取出,迅速冷却,滤过,滤液分装于适宜的容器内,4~8℃贮存,如无沉淀析出,可在3个月内使用。 标准品稀释液的配制 试验当日,精密量取标准品溶液适量,按高低剂量组(ds<[2]>,ds< [1]>)加0.9%氯化钠溶液配成两种浓度的稀释液,一般高浓度稀释液可配成每1ml中含0.01~0.02单位,高低剂量的比值(r)一般不得大于1:0.7。调节剂量使低剂量能引起子宫收缩,一般在20~50mm;高剂量应不致使子宫收缩达到极限,一般为50~85mm,且高低剂量所致子宫的收缩应有明显差别。 供试品溶液与稀释液的配制 按供试品的标示量或估计效价(A<[T]>),照标准品溶液与其稀释液的配制法配成,高低两种浓度的稀释液,其比值(r)应与标准品相等,供试品和标准品高低剂量所致的反应均值应相近。 子宫肌蓄养液的配制医学.全.在.线网站www.lindalemus.com 试验当日,取氯化钠9g、氯化钾0.42g、 氯化钙(按无水物计算)0.06g与葡萄糖0.5g,加水700ml使溶解,另取碳酸氢钠0.5g,加水约200ml溶解 后,缓缓倾注于前一溶液中,随加随搅拌,最后加水适量使成1000ml。 供试用动物 取健康无伤的成年雌性大鼠,断乳后即与雄鼠隔离,出生后不超过 3个月,体重160~240g。试验当日,选择阴道涂片在动情前期的动物,也可用雌性激素处理使子宫涂片为动情前期或动情期的动物。 检定法 取选定的大鼠迅速处死,剖腹取出子宫,仔细分离附在子宫肌上的结缔组织,注意避免因牵拉使子宫肌受损。在子宫分叉处剪下左右2条,取一条将其下端固定于离体器官恒温水浴装置的浴杯底部,上端用线与记录装置相连,以描记子宫收缩;浴杯中加入一定量的子宫肌蓄养液(约30~50ml),连续通入适量空气。蓄养液应调节至32~35℃之间并保持恒温(±0.5℃),子宫放入浴杯后,静置约15分钟,按次序准确注入等体积的标准品或供试品两种浓度的稀释液(0.3~0.8ml),待子宫肌收缩至最高点开始松驰时(约60~90秒钟),放去蓄养液并用蓄养液洗涤一次,再加入等量蓄养液,静置;相邻两次给药的间隔时间应相等(约3~5分钟),每次给药应在前一次反应恢复稳定以后进行。标准品稀释液和供试品稀释液各取高低两个剂量(ds<[2]>、 ds<[1]>、dT<[2]>、dT<[1]>)为一组,按随机区组设计的次序轮流注入每组四个剂量,重复4~6 组。测量各剂量所致子宫收缩的高度,照生物检定统计法(附录ⅩⅣ)中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。 本法的可信限率(FL%)不得大于10%。 |
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文章录入:凌云 责任编辑:凌云 | |||||
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