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药物分析考试西药分析—生物检定统计法(三)

生物检定统计法  例3 量反应平行线测定随机区组设计(3.3)法  新霉素效价测定──杯碟法  S为新霉素标准品  稀释液ds<[1]>∶0.8u/ml  ds<[2]>∶10.0u/ml  ds<[3]>∶12.5u/ml  T为新霉素  标示量  AT∶670u/mg  稀释液dT<[1]>∶8.0u/ml  dT<[2]>∶10.0u/ml  dT<[3]>∶12.5u/ml  r=1∶0.8  I=
 
表5-2 胰岛素双交叉法剂间变异分析
━━━━━━━━┯━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━┯━━━━━━━━━┯━━━━━━━━
        │  第(1)次实验               │   第(2)次实验                  │        │         │
 变 异 来 源│   ∑y(1)                  │    ∑y(2)                  │        │         │   差方和
              ├───────────────────┼────────────────────┤        │         │[∑(C<[i]>.∑y)]<2>
        │S<[1]>(1) S<[2]>(1) T<[1]> T<[2]>(1) │S<[1]>(2) S<[2]>(2) T<[1]>(2) T<[2]>(2)│m.∑C<[i]><2>  │ ∑(C<[i]>.∑y)  │────────
        │1055.82  752.66  1047.40  867.96│1099.05  934.36  1110.90  898.00 │        │         │  m.∑C<[i]><2>
              ├───────────────────┴────────────────────┤        │         │  
         │         (Ci.∑y)                                             │        │         │
────────┼──┬───┬────┬───────┬───┬───┬────┬───────┼────────┼─────────┼────────
 试品间*     │ -1 │ -1 │  1  │  1     │  -1 │ -1 │  1  │  1     │ 10× 8    │  82.37     │   84.8102
 回 归 *     │ -1 │  1 │  -1  │  1     │  -1 │  1 │ -1  │  1     │ 10× 8    │ -860.19     │  9249.0855
偏离平行    │ 1 │ -1 │  -1  │  1     │  1 │ -1 │ -1  │  1     │ 10× 8    │  75.51     │   71.2720
次 间 *      │ -1 │ -1 │  -1  │ -1     │  1 │  1 │  1  │ -1     │ 10× 8    │  318.47     │  1267.7893
次间×试品间  │ 1 │  1 │  -1  │ -1     │  -1 │ -1 │  1  │ -1     │ 10× 8    │ -131.39     │  215.7917
次间×回归   │ 1 │ -1 │  1  │ -1     │  -1 │  1 │ -1  │ -1     │ 10× 8    │  105.01     │  137.8388
次间×偏离平行* │ -1 │  1 │  1  │  1     │  1 │ -1 │ -1  │  1     │ 10× 8    │ -171.93     │  369.4991
────────┴──┴───┴────┴───────┴───┴───┴────┴───────┴────────┴─────────┴────────

  T为胰岛素 标示量A<[T]>:27u/mg
  dT<[1]>∶25mu/ml,0.25ml/鼠
  dT<[2]>∶50mu/ml,0.25ml/鼠
  r=1:0.5
  I=0.301
  反应值y∶血糖值(mg%)
  每组用鼠10只,m=10
  测定结果按表八排列,见表5-1
  (1) 方差分析
  按公式(26)、(27)计算

                             (7766.15)<2>
  差方和(总)=103.99<2>+113.21<2>+…+89.58<2>+110.93<2>-──────
                              2×4×10
  =25 865.8223  f(总)=2×4×10-1=79
         191.00<2>+217.82<2>+…+151.41<2>+206.49<2>  (7766.15)<2>
差方和(动物间)= ──────────────────────-──────
                  2              2×4×10
  =11 320.6387


  f(动物间)=4×10-1=39
  (2) 将表5-1中S、T各剂量组每一次反应值之和按表九及公式 (22)、(28)、(29)、(18)计算各项变异的m·∑C<[i]><2>、∑(C<[i]>·∑y)及差方和、方差,并进行可靠性测验,结果见表5-2、表5-3。
  按(28)、(29)式计算
  差方和(误差Ⅰ)=25 865.8223-11 320.6387-84.8102-9249.0855-1267.7893-369.4991=3573.9995
  f(误差Ⅰ)=4×(10-1)=36
  差方和(误差Ⅱ)=11 320.6387-71.2720-215.7917-137.8388=10 895.7362
  f(误差Ⅱ)=4×(10-1)=36

                  表5-3 胰岛素双交叉法可靠性测验结果
  ────────┬──┬──────┬────────┬────┬────
 变 异 来 源    │ f │ 差 方 和 │ 方  差   │  F  │  P
 ────────┼──┼──────┼────────┼────┼───
  偏离平行   │ 1 │  71.2720 │  71.2720   │ <1  │ >0.05
  次间×试品间 │ 1 │  215.7917 │ 215.7917   │ <1  │ >0.05
  次间×回归  │ 1 │  137.8388 │ 137.8388   │ <1  │ >0.05
  误差(Ⅱ)   │ 36 │10 895.7362 │302.6593(S<2>Ⅱ)│    │     
 ────────┼──┼──────┼────────┼────┼───
  动物间    │ 39 │11 320.6387 │ 290.2728   │ 2.92  │
  试品间    │ 1 │  84.8102 │  84.8102   │ <1   │ >0.05
  回归     │ 1 │ 9249.0855 │ 9249.0855   │ 93.16 │ <0.01
  次间     │ 1 │ 1267.7893 │ 1267.7893   │ 12.77 │ <0.01
  次间×偏离平行│ 1 │ 369.4991  │ 369.4991   │ 3.72 │ >0.05
  误差(Ⅱ)   │ 36 │3573.9995  │99.2778(s<2>)  │    │     
 ────────┼──┼──────┼────────┼────┼───
     总     │ 79 │25 865.8223 │        │    │     
 ────────┴──┴──────┴────────┴────┴───

  结论
  回归非常显著,偏离平行不显著,实验结果成立。两次实验间的差异非常显著,用双交叉设计可以消除实验间变异对实验误差的影响,提高实验的精确度。

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