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2012年公共营养师二级考点:氨基酸总量测定

来源:本站原创 更新:2012-9-26 营养师考试论坛

卵白质经水解或酶解可由从分子酿成小的pro成分,如水解后的产物经胨,肽等最后成为氨基酸,氨基酸是组成pro最根基的物质。

水解后的pro和水解前的pro在物理特征,化学结构以及被领受消化的水平上是很不不异的,其分歧与水解的水平有慎密亲密关系,剖析氨基酸的含量就可以知道水解的水平,也就可以评价食物的营养价值。

氨基酸不是纯挚的一种物质,用氨基酸剖析仪可直接测定出17种氨基酸(仪器价钱昂贵,不能普遍使用),对于食物来说有时有良多种氨基酸可以同时存在于一种食物中医,学,全,在,线,提,供www.lindalemus.com,所以需要测定总的氨基酸量,它们不能以氨基酸百分率来暗示,只能以氨基酸中所含的氮(氨基酸态氮)的百分率暗示,当然,如不美观食物中只含有一种氨基酸,如味精中的谷氨酸,就可以从含氮量计较出氨基酸的含量。

食物在评价卵白质的营养价制瘫,除了测定pro的含量,氨基酸氮含量,还需要对各类氨基酸进行分手,剖断,尤其对8种人体必需氨基酸进行定量定性剖析。

一.单指示剂甲醛滴定法:

1事理:氨基酸具有酸,碱两重性质,因为氨基酸含有-COOH基,而-COOH基显示酸性,又含有-NH2,-NH2则显示碱性,因为-COOH基和-NH2的彼此浸染,使氨基酸成为中性的内盐,当插手甲醛溶液时,-NH2与甲醛连系,其碱性消逝踪,破损内盐的存在,就可用碱来滴定-COOH基,以借居体例测定氨基酸的量,反映式以三种形式存在。

用碱完全中和-COOH基时的PH值为8.4~9.2。

2试剂:

(1)40%中性甲醛溶液:以百里酚酞作指示剂,将甲醛用1N NaOH溶液中和(淡兰色)。(2)0.1%百里酚酞乙醇溶液。(3)0.100N NaOH尺度溶液。

3操作轨范:

称约含20mg摆布的氨基酸→更甚杯中(如为固体样加水50ml)→加两滴指示剂→用0.1N NaOH溶液滴定到淡兰色→加中性甲醛20ml→摇匀→静置1分钟→此时兰色应消逝踪→再用0.1N NaOH溶液滴定淡兰色,记实两次滴定所耗损的碱液毫升数。

计较:氨基酸态氮=(N×V×0.014×100)/W×100

二.双指示剂甲醛滴定法

1事理:

与单色法不异,只是在此法中使用了两种指示剂,从剖析结不美旁观,双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂,但切确,不作介绍)四周,单色滴定法稍偏低,首要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液的PH值作为中性红的终点,PH值为7.0,从理论计较看,双色滴定法比单色滴定法切确。

2试剂:同单指示剂一样,多一个0.1%中性红(50%乙醇溶液)

3操作轨范:

取不异两份样品→分袂于100ml三角瓶→一份加中性红2滴→用0.1N NaOH滴定终点(由红变琥珀色),记适用量,另一份加百里酚酞乙醇液3滴加中性甲醛20ml→摇匀→用0.1N NaOH 滴至淡兰色。

计较:

氨基酸态氮=(N×(V2-V1)×0.014×100)/W×100

V1——用中性红为指示剂时医,学.全,在.线www.lindalemus.com,碱液所耗损的体积

V2——用百里酚酞乙醇液为指示剂时标液耗损量

0.014——氮的毫克当量浓度

注重事项:

(1)单色指示剂甲醛滴定法,用碱完全中和—COOH基时的pH为8.5—9.5

(2)测定样品的颜色较深,应加活性炭脱色之后再滴定

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