三．茚三酮比色法：
1事理：氨基酸在必然pH规模内，能与茚三酮生成兰紫色化合物。可以用比色法定量测定。
2试剂：
（1)磷酸缓冲液（pH.8.04)制备体例如下：
称磷酸二氢钾4.5350g。定容500ml
称NAH2PO4·12H2O 11.9380g分袂消融定容500ml
取磷酸二氢钾10ml与磷酸氢二钠190ml同化即为pH8.04的缓冲液
（2)2%茚三酮溶液医,学.全,在.线www.lindalemus.com：
称茚三酮1g→溶于35ml热水→插手40mg氯化亚锡（SnCl2·H2O)搅拌过滤（作防腐剂)→于冷暗处住宿→定容50ml
① 氨基酸标液
称干燥氨基酸（如异亮氨酸)0.2000g→消融定容100ml→摇匀→吸10ml于此外100ml容量瓶
定容100ml，即得200Ug/ml标液
3操作体例：
（1)绘制尺度曲线：
取7个25ml容量瓶，吸收标液 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0ml于7个25ml容量瓶，加水填补至容积为4ml，然后加茚三酮缓和冲液各1ml，于水浴加热15分钟，冷却后定容25ml，静置15分钟，在570nm下测消光值，绘制尺度曲线。
（2)样品测定：
取样品5.00~10.0g（液体样5-10ml)→更甚杯中→加50ml水和活性碳约5g→加热过滤→用30—40ml热水洗涤活性炭→吸澄清样液1~4ml→加茚三酮缓和冲液各1ml水浴加热15分钟，冷却定容，静置15分钟于570nm下测定消光值，按下式计较氨基酸含量。
氨基酸含量（毫克/100克)=C/（W×1000)×100来历：的美男编纂们
C——从尺度曲线上查得得氨基酸的量（Ug)
W——测定灯揭捉品溶液相当于样品的量（g)
注重事项：
茚三酮受阳光、温度、湿度、空气等影响易被氧化呈淡红或深红色，使用前要进行纯化，体例如下：取10g茚三酮容于40ml热水中，加一克活性炭，摇匀静置30分钟医,学.全,在.线www.lindalemus.com，过滤，将滤液放入冰箱中过滤，即呈现兰色结晶，过滤，用2ml冷水洗涤结晶，置干耘缦泱中干燥，装瓶备用。
思虑题：
1 试述卵白质测定中，样品消化过程所必需注重的事项，消化过程中内容物颜色发生什么转变？为什么？
2 样品经消化进行蒸馏前，为什么冲要手氢氧化钠？这时溶液发生什么转变？为什么？如不美观没有转变，声名侍趵硎题？须采用什么法子？
3 硫酸铜及硫酸钾在测定中起了什么浸染？
4 试述氨基酸态氮的测定事理。
5 结不美观计较中为什么要乘上卵白质系数？
尝试：①水不美观中酸度的测定。
②糕点中和脂肪的测定。
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